Stoffwechseleudprodukte: Nachweis, Bestimm, u. Isolierung v. Aceton etc. 997 



Die eingedampfte Flüssigkeit wird mit einigen Tropfen konzentrierter 

 Salzsäure angesäuert, mit gebranntem Gips zu einer dicken Paste ver- 

 rieben und bis zur beginnenden Erstarrung sich selbst überlassen. 



Die Masse wird gründlich zerstoßen und zweimal mit Äther unter 

 Umrühren und Dekantation des gewonnenen Äthere.xtrakts extrahiert. Nach 

 dem Verjagen des Äthers wird der Rückstand in Wasser aufgonomuifn 

 und mit ßariumkarbonat neutralisiert. Das gewonnene, annähernd neutral 

 reagierende Filtrat wird im Reagenzrohr mit 2 oder ?, Tropfen des ge- 

 wöhnlichen Wasserstoffsuperoxyds versetzt. Nach dem Umschütteln werden 

 alsdann wenige Tropfen einer öVoigen Ferrichloridlösung, welche eine Spur 

 Ferrosalz enthält, zugesetzt. 



Nach wenigen Sekunden tritt eine schöne rosa Färbung auf, welche all- 

 mählich stärker wird und nach Erreichung eines Maximums langsam verl)lar.t. 



Nach Black kommt es bei der Ausführung der Reaktion wesentlich 

 darauf an, daß die zu prüfende Lösung kalt und annähernd neutral ist 

 und ferner darauf, einen großen Überschuß von Eisen und Wasserstoff- 

 superoxyd zu vermeiden. Wird zuviel Oxydationsmittel zugesetzt, so tritt 

 die Färbung nur kurze Zeit oder auch gar nicht auf. 



Nach den Angaben Blacks ist die Reaktion sehr empfindlich. Sie soll 

 noch bei einer Verdünnung von 1 : 10.000 auftreten. 



Der Gedanke, die [^-Oxybuttersäure zum Zwecke ihres Nachweises zu 

 der mittelst der Eisenchloridreaktion so leicht erkennbaren Acetessigsäure 

 zu oxydieren, ist gewiß ein glücklicher. Wir haben die Versuche Blacks 

 einer Nachprüfung unterzogen und können bestätigen, daß die von ihm 

 angegebene Farbenreaktion bei stärkeren Konzentrationen an ß-Oxybutter- 

 säure recht deutlich ist. 



Bei geringeren Konzentrationen dagegen erschien die Rosafärbung nur 

 schwach und wurde bereits durch recht geringe Mengen überschüssigen 

 Eisenchlorids undeutlich. 



Die Reaktion wird viel deutlicher und empfindlicher, wenn man sie 

 nicht, wie Black, am neutrahsierten, sondern direkt am sauren Ätherextrakt 

 nach dem Verjagen des Äthers anstellt. Es tritt dann nicht eine rosa 

 Färbung, sondern fast augenblicklich die typische violette „Eisenchlorid- 

 reaktion" ein. Am zweckmäßigsten' verfährt man nach unseren Erfahrungen 

 so, daß man dem sauren in Wasser aufgenommenen, eventuell durch Kochen 

 von Acetessigsäure befreiten Ätherextrakt des Harns zunächst einige 

 Tropfen Wasserstoffsuperoxyd und dann vorsichtig tropfenweise eine ver- 

 dünnte, etwa 57oige Ferrosulfatlösung zufügt. Da das Ferrosalz dabei zum 

 Ferrisalz oxydiert wird, ist der besondere Zusatz eines Ferrisalzes unnötig. 

 Man hört mit dem Zutropfen der Ferrosulfatlösung dann auf, wenn weiterer 

 Zusatz keine Verstärkung der Färbung mehr hervorruft. 



Neben dem Nachweis der ß-Oxybuttersäure durch Überführung in 

 a-Crotonsäure und Identifikation der letzteren mittelst Schmelzpunktbcstim- 

 mung wird die von Black angegebene Farbenreaktion, namentlich in der eben 

 geschUderten Modifikation, vielleicht mit Nutzen angewandt werden können. 



Abderhalden, Handbuch der biochemischen Arbeitsmethoden. HI. 59 



