WQO Jacques Loeb. 



Ist der geöffnete Seeigel ein Männchen, so muß der Experimentator 

 Hände und Instrumente sofort sterilisieren, da sonst die Kulturen leicht 

 mit Samen infiziert werden. Zum Sterilisieren der Hände genügt Abwaschen 

 derselben mit Seife und gründliches Trocknen derselben. Die Instrumente 

 werden in der Weise desinfiziert, daß man sie in Süßwasser legt und dann 

 gründlich abtrocknet. Dazu ist es nötig, die Scherenschenkel auseinander 

 zu nehmen. Es ist wesenthch, daß die Eier unmittelbar nach der Heraus- 

 nahme zu dem Versuch benutzt werden. Nur auf Eis lassen sie sich einige 

 Stunden oder vielleicht etwas länger für den Versuch brauchbar erhalten. 

 Ebenso ist es unerläßliche Vorbedingung, daß die Seeigel selbst vor dem 

 Versuch nicht an Sauerstoffmangel leiden. Wo es tunlich ist, entnimmt man 

 am besten die Seeigel für jeden Versuch frisch aus dem Ozean. 



Die Entwicklungserregung kann mit und ohne Membranbildung ge- 

 schehen. Um die Membranbildung hervorzurufen, mischt man 2 :8cm ^ einer 

 Vio einbasischen Fettsäure (z. B. Buttersäure) mit bOcm^ Seewasser. (Gründ- 

 liche Mischung nötig !) Dann werden die Eier in diese Mischung gebracht, 

 und mit einer Pipette in derselben zerstreut, so daß jedes Ei sofort mit 

 der Säure in Berührung kommt. Dann läßt man die Eier langsam zu Boden 

 fallen. Sobald alle am Boden sind, bringt man dieselben durch mäßiges 

 Rotieren des Gefäßes alle in das Zentrum des letzteren. Man kann dann 

 mit der Pipette die Eier fast ohne anhaftende Säure in normales Seewasser 

 zurückbringen. Dieses Übertragen der Eier in normales Seewasser geschieht 

 bei 15" in anderthalb bis zwei Minuten. Man hat zu dem Zweck vier 

 Schalen, jede mit 200 cm^ Seewasser, bereit stehen. Nach anderthalb Minuten 

 tiberträgt man die erste Pipette voll Eier aus dem säurehaltigen in das 

 normale Seewasser und alle halbe Minute wird eine neue Pipette mit Eiern in 

 eine neue Schale übertragen. Man erhält auf diese Weise mit Sicherheit 

 mindestens eine Schale, in der alle Eier eine völlig normale Befruchtungs- 

 membran bilden, i ) 



Da für jede Seeigelform andere Konzentrationen und Zeiten gewählt 

 werden müssen, so ist es nötig, vor jedem Versuch mit einer Spezies die 

 für dieselbe geltenden Zeiten und Säurekonzentrationen in der angegebenen 

 Weise zu ermitteln. Bei zu kurzer sowohl wie bei zu langer Expositions- 

 dauer bleibt die Membranbildung aus. 



Nach der Behandlung mit Säure haben die Eier eine Tendenz zu 

 agglutinieren. Man kann das Agglutinieren der membranhaltigen Eier da- 

 durch verhindern, daß man dieselben von Zeit zu Zeit leicht mit der Pipette 

 in Bewegung erhält. Das Agglutinieren der Eier ist übrigens von keinen 

 ernstlichen Folgen für den Erfolg des Versuches begleitet. 



Etwa zehn Minuten nach der künstlichen Membranbildung bringt man 

 die Eier in hypertonisches Seewasser. Als hypertonisches Seewasser dient 

 in meinen Versuchen eine Mischung von bOcm^ Seewasser und 7 — Scm^ 

 2V2 n-NaCl-Lösung. In dieser Lösung bleiben die Eier 30 — 50 Minuten. 



*) Loeb, Untersuchungen über künstliche Parthenogenese. Leipzig 1906. S. 329. 



