Die wichtigsten Methoden der Imniunifatsforschung. ijfj-j 



Ein Meerschweinchen wird durch einon lan-en Schnitt mit .l.,,, l;,.,,-,- 

 messer am Halse getötet und das herausspritzendo I'.iiit dun-li einen j^nil'KTcn 

 Trichter ni em Zentrifu-iergefäß aufgefangen. Nuclidcrn da^ Hhit voll- 

 kommen geronnen ist, wird es, wie oben bcschriel.cn. von .Icr Wand des 

 Glases abgelöst und stark zentrifugiert. Xacb einer Nicrtclstundc kann 

 man das klare Serum mit einer Pipette mit (;uniniiliiitcli<.n untrr Kontn.ll.- 

 des Auges absaugen. Von einem mittleren Meerschweinchen ^'ewiniit man 

 etwa 6 — 10 cni^ Serum. 



Der Komplementgehalt des frischen Serums nimmt bei Zimmer- 

 temperatur schon in einem Tage stark ab, weniger im gut gekühlten Kis- 

 schrank. Verläßlich konstant bleibt der Kompleinentgehalt für mehreie Tage 

 nur beim Einfrieren. 



Zur Prüfung des Hämolysins stelle man sich die <.l>.'n bexlniebene 

 50/oige Blutkörperchenaufschwemmung her. 



Der Nachweis des Hämolysins. 



Man fülle in gewöhnliche große Reagenzgläser je 1 <■»/■■ der ä" eigen 

 Blutaufschwemmung und je 1 cm^ des zehnfach verdünnten Komi)Iementes, 

 ferner je 1 cui^ verschiedener Verdimnungen des inaktivierten Hämolysins 

 (des „Ambozeptor" oder .,Sensibisator"j. Als geeignete NCniünnunü-en nehme 

 man z.B. Vio, Vsoi Vioo, Vsoo, Viooo- l on-^ hiervon entspricht also i>i. 

 0-03, 0-01, 0-003, 0-001 cni^ Serum. 



Nach guter Durchmischling werden die Röhrchen in ein Wasserbad 

 oder in den Brutschrank von 37" gebracht, nach zwei Stunden nehme man 

 sie heraus und bewahre sie im Eisschrank bis zum nächsten Tag auf. 

 In den ersten Röhrchen wird die Hämolyse schon nach einigen Minuten 

 bis nach 2 Stunden komplett sein, d. h. die Flüssigkeit ist lackfarbeii 

 ohne jedes Sediment, in den mittleren Röhrchen ist die Flüssigkeit weniger 

 gerötet und die Kuppe des Reagenzglases ist am nächsten Tage von 

 einem Sediment roter Blutkörperchen bedeckt. In den letzten Köhrchen 

 ist die Flüssigkeit farblos und die Blutkörperchen liegen intakt auf dem 

 Boden des Glases. Wenn man auf die Beobachtung des Sedim«'nts verzichten 

 will, kann man das gleiche Resultat sofort nach 2stündigem .Aufenthalt im 

 Brutschrank bekommen; die undurchsichtige Rlutköriterchenanfschwemmnng 

 wird lackfarben. Unter der einfach löslichen Dosis des .Vmbozeptors ver- 

 steht man diejenige Menge, welche bei dieser Versuchsanordnung gerade 

 eben vollkommene Hämolyse hervorruft. Nadi obigem \ Orversuch muß sie 

 durch eingeschaltete Zwischenglieder näher präzisiert werden. Hin guter 

 Ambozeptor kann nicht selten eine lösende Dosis von weit weniger als 

 0-001 cm^ haben. 



Die hiermit bestimmte lösende Dosis beziidit sich auf die gleichzeitige 

 Wirkung von 0-1 cm^ Komplement. Im allgemeinen gilt al)er die Kegel: je 

 mehr Komplement, um so kleiner ist die lösende Dosis des Aml)oz«'ptors, 

 je mehr Ambozeptor, um so kleiner ist die lösende Dosis des Komplements. 

 Es besteht aber keine Proportionalität in dieser Beziehung. 



