Die wichtigsten Methoden beim Arheiten mit Pilzen und Bakterien. 1233 



bricht. Zur Abimpfung unter dem Mikroskop wird nun der am Glasstab 

 befindliche Faden sofort benutzt, da er ohnehin durch das Erhitzen beim 

 Ausziehen sterilisiert wurde. Nun impft man in der anf^egebenen Weise 

 ab und übertragt die am Glase heftenden Bakterien dadurch in die Flüssig- 

 keit, daß man durch einen leichten Stoß die infizierte Nadelspitze abbricht 

 und mit den Bakterien in der Nährflüssigkeit beläßt. 



2. Der Agarplattenguß. 



Der in Proberöhrchen sterilisierte Nähragar wird im kochenden 

 Wasserbade verflüssigt und dann die Eöhrchen in ein Wasserbad von 

 40'' C eingesetzt. Nach Abkühlung des Inhaltes auf diese Temperatur wird 

 wie beim Gelatineplattenguß verimpft, gemischt und die Verdünnungen 

 angelegt. Man muß aber sehr rasch arbeiten, da Agar die Eigenschaft hat, 

 nur bei einer Temperatur von über 38" C flüssig zu bleiben und einmal 

 erstarrt, erst wieder bei ungefähr 90° zu verflüssigen. Nunmehr wird in 

 sterile Schalen ausgegossen, die aber in diesem Falle keiner besonderen 

 Kühlung bedürfen. Die weitere Behandlung und Verarbeitung deckt sich 

 mit dem für Gelatineplatten Mitgeteilten. Nur die Züchtungstemperatur 

 kann beliebig erhöht werden, ohne daß eine Verflüssigung eintntt. 



Für pathologische Untersuchungen bedient man sich sehr häufig der 

 Blutserum -Agar platten. Hier benutzt man einen Nähragar mit 3% 

 Agargehalt, den man in Eprouvetten sterilisiert vorrätig hält, ^'or dem 

 Gebrauch wird der verflüssigte und auf 40" C abgekühlte Nähragar mit 

 dem auf 40° C erwärmten flüssigen Blutserum (S. 1215) zu gleichen Teilen 

 gemischt, zu Platten verarbeitet und dann nach dem Erstarren mit dem 

 zu untersuchenden Substrat bestrichen. Zu dem Ende benutzt man einen 

 Pinsel von feinstem Platindraht, der vor dem Gebrauch ausgeglüht wird und 

 mit dem nach einmaligem Eintauchen in das zu untersuchende Substrat 

 sich kreuzende Striche auf der Platte ausgeführt werden. Will man mit 

 dem Blutserum agar die üblichen Verdünnungen anlegen, so stellt man sie 

 mit dem erwärmten Blutserum allein her, schüttelt gut durch, versetzt 

 dann mit dem verflüssigten abgekühlten Agar und gießt Platten. 



Um die mitunter sehr störende Bildung von Kondensw^ asser aus 

 dem Agar auf ein Minimum herabzudrücken, kann man dem Nähragar 

 V/o Gelatine zufügen, ohne den Erstarrungs- und Schmelzpunkt des 

 Nährsubstrates wesenthch zu ändern. 



3. Reinzucht von einer Zelle unter Kontrolle. 



Die Reinzucht von einer Zelle weg erreicht man nach dem Verfahren 

 von E. Chr. Hansen^): Man benutzt dazu eine feuchte Kammer und 

 ein steriles Deckgläschen von 20 mm Seitenlänge. Als Feuchtkammer 



*) Hansen, Comptes rendus de laboratoire de Carlsberg (1883). Die angegebene 

 Methode ist etwas modifiziert. 



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