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Frauz Fuhrmann. 



IV. Anaerobe Zucht und Kultur in bestimmten Gasen oder Gas- 

 gemischen. 



Für die anaerobe Zucht verwendet man dort, wo es überhaupt geht, 

 unmittelbar vor der Kulturanlage ausgekochte Nährsubstrate. Natürlich 

 geht dies mit Blutserum oder anderen in der Hitze koagulierenden Substanzen 

 nicht. In diesen Fällen bringt man die Nährsubstrate möglichst unmittel- 

 bar vor dem Gebrauche unter den Rezipienten einer guten Luftpumpe 

 durch wenigstens eine halbe Stunde. 



Die Absperrung und Entfernung des Luftsauerstoffes erreicht man 



auf verschiedene Weise. Die einfachste Methode besteht darin, eine Kultur 



in hoher Schicht anzulegen. Zu diesem Ende benutzt man am besten 



frisch erstarrten Nähragar in engen und hohen Proberöhrchen. Es mrd 



eine Stichkultur mit der Platinnaclel durch senkrechtes, 



bis zum Boden reichendes Einstechen ausgeführt und 



von mindestens 3 cm Höhe 

 Lihorius macht das gleiche bei Gelatinenähr- 

 substraten. Diese Kulturen gestatten z^Yar eine gute Be- 

 obachtung der makroskopisch wahrnehmbaren Wachstums- 

 erscheinungen im Stichkanal, bieten aber große Schwierig- 



Ab- 



darüber noch eine Schicht Agar 

 gegossen. 



zur 



Fig. 374. 



keiten bei der Entnahme von Kulturmaterial 

 Impfung und mikroskopischen Untersuchung. 



Für einfachere Anaerobenversuche bedient man sich 

 deshalb einer zweckmäßigeren Kulturmethode, die von 

 # m Buchner angegeben wurde und allgemein als Kultur in 

 ^_y der Buchnerröhre bekannt ist. Nebenstehende Fig. 374 

 zeigt uns zwei Bohren, die in ihrem Innern die gewöhnlichen 

 Kulturröhrchen enthalten. Man legt auf einem frisch ausge- 

 kochten, schräg erstarrten Agar- oder Gelatiuenährboden eine Strichkultur an, 

 dann beschickt man entweder die kugelförmige Auftreibung der Buchnerröhre 

 oder den unteren Teil derselben (Fig. oT-i, links) mit Pyrogallus säure in Sub- 

 stanz, und zwar ca. 0*20^. Hierauf läßt man durch einen langgestielten 

 Trichter 0'25o/oige Kahlauge einfließen (8 cm.^). Nunmehr schiebt man die 

 Kulturröhre ein und verschließt sofort mit einem dichtsitzenden Kautschuk- 

 stopfen. Die alkalische Pyrogallollösung absorbiert den Sauerstoff und hält 

 die Kultur 0-frei. Absolut sicher ist das ^'erfahren nicht, da kein Indikator 

 etwa vorhandenen Sauerstoff anzeigt und die Absorptionsfähigkeit der ge- 

 ringen Menge alkalischer Pyrogallollösung sehr bald nachläßt und endUch 

 ganz erlischt. Außerdem sind die Kautschukstopfen nicht gasdicht, denn 

 so gezüchtete Leuchtbakterien leuchten ausgezeichnet. Erst vollständiges 

 Abschmelzen der Röhre bewirkt einen sicheren Ausschluß von Sauerstoff. 

 Dann leuchten auch die Leuchtl)akterien nicht mehr. Wo es sich um 

 sehr exakte Versuche handelt, ist daher unbedingt die Kultur- 

 röhre nach der Beschickung abzuschmelzen. 



