Die wichtigsten Metboden beim Arbeiten mit Pilzen und Bakterien. 1241 



3 g Indigotin werden in einer Reibschale mit konzentrierter Schwefel- 

 säure (60 fj) verrieben und durch 24 Stunden stehen gelassen. Nunmehr 

 bestimmt man das Volumen und verdünnt mit der genau vierfachen 

 Menge destillierten Wassers. Von dem entstandenen Niederschlag wird 

 abfiltriert, l cm^ dieser Indigolösung soll einen Schwefelsäuregehalt auf- 

 weisen, der 38-2 cm^ Vio-Normalalkali entspricht. Den Titer bestimmt man, 

 indem man in einer Porzellanschale 5 cm^ der Indigolösung mit 3—5 cm» 

 konzentrierter Salpetersäure versetzt und auf dem Wasserbade eindampft, bis 

 zur Verjagung der HNO3. Den Rest nimmt man in einem MelJkoliien 

 von 100 cm'i Inhalt mit Wasser auf und verdünnt genau bis zur Marke. 

 Von dieser Lösung titriert man 20 crn^ unter Benutzung von Phenolphtalein 

 als Indikator. Nun korrigiert man durch Zusatz von Hj (J oder \h SUi den 

 Säuregehalt der ursprüngUchen Indigolösung entweder so lange, bis er einer 

 Menge von 38-2 Vio-^ormalalkali entspricht , oder aber berechnet die 

 Menge von Indigolösung, die diesem Säuregehalt entspricht. Letzteres \'er- 

 fahren ist empfehlenswerter, da es rasch und sicher zum Ziele führt. Die 

 Hälfte der berechneten Menge ergibt sofort die für eine Indi- 

 katorherstellung nötige Indigolösungmenge. Die Herstellung des 

 fertigen Sauerstoffiudikators wird später angegeben. 



Die Ausführung dieser anaeroben Zucht geschieht auf folgende Weise : 

 In die runde Glasschale kommt eine Mischung von: 



500 cm^ lo/oigei" wässeriger Karbolsäurelösung, 



70 cm 3 20''/oiger Lösung von kristallisiertem Natriumkarbonat, 



50 g Traubenzucker. 



Darauf wird 500 cm^ Paraffinöl gegossen. Nun stellt man in die 

 Mitte der Schale den gläsernen Dreifuß und gibt darauf die halbe Petri- 

 schale, in der man eine Portion Pyrogallol und eine Portion KOH bringt. 

 Darauf legt man ein Glasdreieck und stellt auf dieses, mit dem Boden nach 

 oben gewendet, die offene Kulturschale. Dann folgt wieder ein Glasdreieck 

 und eine beschickte Kulturschale, wie es Fig. 378 zeigt. Nun verbindet man 

 mit dem Wasserstoffapparat das gebogene Röhrchen der Fig. :'»7(). Das 

 andere Röhrchen mit abgebogener Spitze wird durch einen Kautsclmk- 

 schlauch mit einer mit frisch ausgekochtem Wasser gefüllten Bürette ver- 

 bunden, der Schlauch mit einem Quetschhahn versehen und so weit Wasser 

 zuströmen gelassen, bis das Röhrchen bis zur Spitze gefüllt ist. Nunmehr 

 stellt man sich die Indikatorlösung her. Als solche dient für die Zucht 

 bei Zimmertemperatur (18— 20''C) folgende Flüssigkeit: 



50 cm^ einer l"/oigen Karbolsäurelösung, 



5 cm^ einer 20Voi&en kristallisierten Natriumkarbonatlösung. 

 Olme Erwärmen wird dariimen gelöst: 



1 g chemisch reiner Traubenzucker 

 und nach der Lösung zugesetzt 0-5 cm^ der schwefelsauren Indigolösung 

 bzw. die Menge, welche der oben angegebenen Alkalimenge "(191 ctn^ Vio N) 

 im Säuregehalt entspricht. 



