Die wichtigsten Methoden beim Arbeiten mit Pilzen und Bakterien. 1251 



färbungen mit MethylenbLau müssen vorfienommen werden, um das Ver- 

 schwinden der gefällten Eiweißsubstanzen bei der Verdauung festzustellen. 

 In einer weiteren Serie von Präparaten ist noch der Einfluß von lO^/o 

 Natriumchloridlösung und konzentrierter Sodalösung auf die mit Methyl- 

 grün färbbaren Zellanteile zu untersuchen, die damit größtenteils heraus- 

 gelöst werden müssen, sofern es sich um Nukleinverbindungen handelt. 



Von stickstoffhaltigen Zelleinschlüssen sei hervorgehoben das Yolutin 

 von A. Meijer'^), zu dessen Nachweis folgende Reaktionen angestellt werden 



Das einfach angetrocknete Ausstrichpräparat von Bakterien 

 wird mit einer frisch bereiteten Methylenblaulösung (1 Teil gesättigte 

 alkoholische Methylenblaulösung und 10 Teile Wasser) durch 2 Minuten 

 bei Zimmertemperatur gefärbt. Dann wird in Wasser gespült und unter 

 einseitiger Zwischenschaltung eines feinen Glasfadens ein Deckgläschen 

 aufgelegt (vgl. S. 1247). Pilzhyphen werden in Wasser unter einem einseitig 

 unterstützten Deckglas eingelegt und nach Fixierung des Deckglases 

 Methylenblaulösung mit Filtrierpapier durchgesaugt (siehe S. 1247) und mit 

 Wasser in derselben Weise gründlich gewaschen. Das Volutin erscheint 

 als tief dunkelblaue, etwas gequollene, runde Masse von kleineren und 

 größeren Körnchen. Beim Durchsaugen einer bo/oigen Natriumkarbonat- 

 lösung tritt an Stelle der blauen Volutanskugeln eine helle Stelle im noch 

 immer blaugefärbten Zytoplasma. Diese Stelle besitzt ein geringes Licht- 

 brechungsvermögen. Nach Waschen mit Wasser und neuerlicher Färbung 

 mit der oben angegebenen Methylenblaulösung und Nachwaschung mit 

 Wasser, das eine Spur Schwefelsäure enthält, erscheint das Volutin abermals 

 dunkler gefärbt als das Protoplasma. 



Ein ebenso bereitetes Trockenpräparat wird mit der angegebenen 

 Methylenblaulösung durch 5 Minuten gefärbt. Nach Zusatz von P/oiger 

 Schwefelsäure zu dem gewaschenen Präparat treten die Volutans- 

 kugeln stark blau gefärbt hervor. 



Ein weiteres Präparat wird wieder mit Methylenblau ö Minuten 

 gefärbt, gewaschen und bedeckt. Beim Zufließen von Jod -Jodkalium- 

 lösung (2 (/Jod, 1^ Jodkalium, 200 ow^ Wasser) bekommen die Volutans- 

 massen eine fast schwarze Farbe. Auf weiteren Zusatz von 5Voiger 

 Natriumkarbonatlösung färbt sich das Zytoplasma wieder blau, während 

 die Volutanskugeln verblassen. Nach dem Waschen mit Wasser und 

 Färbung mit Methylenblau und Nachwaschen mit angesäuertem (H2SOJ 

 Wasser treten sie wieder blau gefärbt hervor. 



Kocht man das Präparat durch 5 Minuten in siedendem Wasser 

 aus, färbt mit Methylenblau oder Karbolfuchsin und setzt dann P/oige 

 Schwefelsäure zu, so sind keine gefärbten Volutanskugeln mehr zu bemerken. 



Durch Einlegen der Zellen in öVoige Schwefelsäure durch 

 10 Minuten wird das Volutin ebenfalls gelöst und läßt sich nicht mehr 



1) A.Meyer, Orientierende Untersuchungen über Verbreitung, Morphologie und 

 Chemie des Volutins. Botanische Zeitung. I. Abt. Jg. 62. S. 113 (1904). 



