Die wichtigsten Methoden beim Arbeiten mit Pilzen und Bakterien. 1255 



senkrechten Aufstellung- fließt die nicht erstarrte überschüssige Oelatino 

 ab und erstarrt dann im unteren Teil der Eprouvette. Wenn nun die Ku- 

 zymlösung aufgegossen wird, bietet sich ihr eine sehr grolie und dünne 

 Gelatinefläche dar, die durch den suspendierten Zinnober deutlich sichtbar 

 ist. Selbst eine sehr geringe Lösung derselben zeigt sich dann an dem 

 Durchsichtigerwerden der Gelatineschicht und dadurch, daß sich ein Über- 

 schuß von freigewordenem Zinnober an der untersten Stelle der Berührungs- 

 fläche zwischen Lösung und Gallerte ansammelt. In Fig. 382 sind- solche 

 nach Schonten hergestellte Gelatineröhrchen wiedergegeben. In der linken 

 iProberöhre zieht sich die Zinnober-Gelatineschicht in dünner Lage hoch 

 hinauf. Die auf proteolytische Enzyme zu untersuchende Lösung ist darüber 

 geschichtet. Um Verdunstung hintanzuhalten, dichtet man den Wattever- 

 schluß der Röhrchen noch durch Aufgießen von Paraffin. Fig. 382 zeigt 

 uns links das mit der auf proteolytisches Enzym zu 

 untersuchenden Flüssigkeit überschichtete Thymolgela- 

 tineröhrchen, vergossen mit Paraffin. Die rechte Ab- 

 bildung läßt erkennen, daß die an der Wand befind- 

 liche, dünne Zinnobergelatineschicht bereits herab- 

 geflossen ist. 



Für Adele Zwecke eignet sich zum Nachweis von 

 Proteasen auch die Methode der Gelatineplatten. 

 Man gießt die Karbol- oder Thymolgelatine in Petri- 

 schalen in einer Dicke von 1 — 3 mw aus und läßt 

 erstarren. Dann saugt man enzymhaltige Substrate, 

 die durch eine Desinfektion mit 1 — 3''/oiger Karbol- 

 säurelösung von aUen lebenden Bakterien befreit sind, 

 in poröse Stoffe, wie kleinste Bausteinstückchen oder 

 Filtrierpapierstückchen auf und legt diese auf die 

 Gelatinefläche. Dem Gehalt an Proteasen entsprechend 

 wird um dieselben und unter denselben eine mehr oder 

 minder große Menge der Gelatine verflüssigt. Grobe 

 quantitative ITnterschiede können damit schon fest- 

 gestellt werden, für feinere Untersuchungen eignet sich diese Methode jedoch 

 nicht. Durch Aufbewahren der beschickten Gelatineplatten in einer feuchten 

 Kammer verhütet man auch hier die Verdunstung und Eintrocknung. 



Zum Nachweis eines Elastin lösenden Enzymes bedient man sich 

 des Verfahrens nach Eijkman.^) Das Elastiu wird aus feingeschnittener 

 Kalbslunge durch tagelanges Behandeln mit verdünnter Kalilauge und Essig- 

 säure bei 37" C gewonnen. Nach dem Auswaschen des restierenden Elastins 

 mit Wasser wird getrocknet und fein pulverisiert. Vor dem (iebrauch 

 wird das Pulver in Wasser aufgeschwemmt, einer fraktionierten SteriHsation 

 bei 90" unterzogen und nach dem Absitzen der gröberen Teilchen die 



Fig. 382. 



*) C. Eijkman, t)ber Enzyme bei Bakterien und Schimmelpilzen. Zentralbl. f. 

 Bakt. I. Abt. Orig. Bd. 35 (1904). 



