Die wichtigsten Methoden beim Arbeiten mit Pilzen und Bakterien. 1259 



zugesetzt, gut geschüttelt und die Kultur durch ein Porzollanfiltor filtriert. 

 Das Filtrat wird weiter nach der Blumenthahchen Methode der Labpepsin- 

 trennung behandelt. Dementsprechend wird dasselbe mit OlVoip^er Schwefel- 

 säure schwach angesäuert und mit einem Cberschuß von Kochsalz ver- 

 setzt, so daß ein ungelöster 8alzrückstand verbleibt. Es scheidet sich au 

 der Oberfläche ein schneeweißer Schaum ab, der ein verh iltnismäbig reines 

 Lab darstellt. Dieses wird in Wasser gelöst und durch Dialyse salzfrei ge- 

 macht. Die Labwirkung prüft man auf Milch oder Kaseinlösungen mit ge- 

 ringem Kalkzusatz. 



2. Kohlenhydratspaltende Enzyme. Diese werden in Lösungen 

 oder in Kulturen entweder mit der Diffusions methode nach Wysmann 

 oder mittelst der Auxanographie Beijerinds nachgewiesen. 



Diffusionsmethode Wi/suumns^): Da hier nicht lebende Organismen 

 das Reagens sind, kann bei dieser Methode mit desinfizierten Enzym- 

 lösungen gearbeitet werden. Gelatineplatten werden mit dem zu unter- 

 suchenden Kohlenhydrat durchsetzt und mit einem Tröpfchen der Enzym- 

 lösung beschickt. Aus dem Tröpfchen diffundiert das P^nzym in die Gela- 

 tineplatte und bewirkt in dem darin gelösten oder suspendierten Kohlen- 

 hydrat die Veränderungen. Wird nachher die Platte mit einem Pvcagens 

 Übergossen, das Farbenreaktionen mit dem ursprünglichen oder mit den 

 entstandenen Produkten auslöst, so treten besonders gefärbte Diffusions- 

 felder auf. War beispielsweise in der Platte Stärke suspendiert und wurde 

 Araylaselösung aufgetropft, so \rird nach einiger Zeit durch aufgegossene 

 Jodlösung die unveränderte Stärke mit Blaufärbung reagieren, die Platte 

 also überall dort, wo keine Veränderung der Stärke statthatte, blau sein, 

 während die Gelatine um den Amylasetropfen farblos bleibt. Bei der Bildung 

 sich anders färbender Spaltungsprodukte werden ^Mischfarben entstehen, 

 die zonenartig den Ausgangspunkt der Enzymwirkung umgeben. 



Bei der Untersuchung der bakteriellen kohlenhydratspaltenden Enzyme 

 können die angeführten Methoden mit geringen Modifikationen mit N'orteil 

 angewendet werden. 



Auxanographie 2): Empfindliche, qualitative Reagenzien auf eine 

 Reihe von Spaltungsprodukten der enzymatischen Kolilenhydratzerlogung 

 sind gewisse niedere Organismen selbst. So vermögen bestimmte llefearten 

 nur dann sich zu entwickeln, w^enn ganz bestimmte Zuckerarten vorhanden 

 sind,.während mit anderen Kohlenhydraten jedes Wachstum unterbleibt. Diese 

 beiMikroorganismen weitverbreitete ausAvählendeFähigkeit bonutzte^t'/ytTmcÄ: 

 zur Ausarbeitung der auxanographischen Methode, die für die Unter- 

 suchung der qualitativen Verhältnisse der Kohlenhydratspaltung gute Dienste 

 leistet. Als Nährboden für die Versuche verwendet JSeycr/wcA: folgende Gelatine: 



1) Wi/smann, De diastase beschouwed als mengsei van Maltase en Dcxtrinase. 

 Amsterdam 1889. 



'-) Beijerinck, tJber Nachweis und N'erbrcitang der Glukaso, das Enzym der Mal- 

 tose. Zentralbl. f. Bakt. IL Abt. Bd. 1. S. 221 (1895). 



