Die wichtigsten Methoden beim Arbeiten mit Tilzon und Bakterien. 1201 



Amylasenachweis: Nach der auxanographischen Methode ver- 

 fährt man in der Weise, dali man die oben genannte Gelatine herstellt 

 und lösliche Stärlce in einer Menge von 0-5"/o zusetzt. Hierauf beimpft man 

 eine Gelatineprobe bei ;>2" C mit einer Glukose Hefe, z. P>. Saceharomyces 

 apiculatus, eine zweite mit einer Polysacchai-osehefe, z. B. Saccliaromvces 

 acetaethvlicus. Nach gleichmäßiger Verteilung der Ilefenzellen im Substrat 

 gießt man die Platten in Petrische Schalen und läßt rasch erstarren. Jetzt 

 bringt man Tröpfchen des Kulturfiltrates, das auf Amylase zu untersuchen 

 ist, auf die Platten oder verimpft direkt Mikroorganismen darauf. Im 

 Umkreis desjenigen Tröpfchens, das Amylyse enthält, wird zumindest die 

 Polysaccharosehefe anwachsen, wenn die Spaltung in Dextrin erfolgt ist. 

 Findet eine tiefere Spaltung bis zu (ilukosen statt, dann wird auch in der 

 ersten Platte Wachstum der Glukosehefe eintreten. 



Mit der Diffusionsmethode gelingt der Nachweis ebenfalls leicht, wie 

 auf S. 1259 angegeben ist. 



Für den Nachweis von Amylase bei Bakterien, die nur bei Brut- 

 temperatur gedeihen, ist die Gelatineplatte natürlich nicht zu gebrauchen. 

 Hier suspendiert man nach dem Vorgange von van Senus und Ei jknian^) 

 Stärke in Agarplatten und verimpft darauf Striche oder Punkte mit der 

 zu untersuchenden Bakterienart oder Pilzart. Bei der Produktion von 

 diffundierender Amylase wird der Nährboden im Umkreise der ent- 

 stehenden Kolonien dadurch aufgehellt und durchsichtig, weil die Stärke 

 in lösliche Verbindungen aufgespalten wurde. 



Gelasenachweis nach Gran^): Verwendet wird ein Nähragar, der 

 l-öo/o Agar, 30/0 Kochsalz, l"/o Pepton und O-lVo Monokaliumphosphat ent- 

 hält, eine schwach alkaUsche Reaktion aufweist und mit Lackmus oder 

 Azolithmin schwach gefärbt wird. Das Nährsubstrat wird verflüssigt und 

 bei 40" C mit Bacillus phosphorescens Beijerinck gleichmäßig be- 

 impft. Hierauf werden Platten gegossen und dieselben nach dem Erstarren 

 auswachsen gelassen. Nach 3 Tagen, nach welcher Zeit die Platten nur 

 kaum mehr leuchten, wird darauf die Bakterienart in Form von Strichen 

 verimpft, die auf die Fähigkeit der Agarhydrolyse untersucht werden soll. 

 Enthält die Bakterienart ein solches Enzym, so entstehen innerhalb kurzer 

 Zeit um die Impfstriche leuchtende Felder. 



Der Nachweis von fettspaltenden Eigenschaften bei Pilzen und 

 Bakterien gehngt leicht nach der Methode von Eijkman (1. c). Danach 

 wird der Boden von Pe^rischen Schalen mit einer dünnen Schicht von Fett, 

 vornehmlich Bindertalg, bedeckt. Darüber wird mit dem noch flüssigen 

 Agar eine Platte gegossen, auf die die zu untersuchenden Bakterien ver- 

 impft werden. In Agar diffundierende Lipasen zersetzen dann den Talg 



*) Eijkman, Über Enzyme bei Bakterien und Schimmelpilzen. Zentralbl. f. Bukt. 



I. Abt. Bd. 29 (1901). 



2) H. H. Gran, Studien über Meeresbakterien. II. t)ber die Hydrolyse des A?ar- 

 Agars durch ein neues Enzym, die Gelase. Bergens Museum, Aarbog. Heft 1 (1902). 



