Die wichtigsten Methoden beim Arbeiten mit Pilzen und Bakterien. 1267 



Als Indikator für Säurebestimmungen verwendet man am 

 besten nach A.Meli/er^) eine Lösung von Ov) (/ Kosolsäure in 50 cw^ 

 Alkohol, die mit dem gleichen Volumen destillierton Wassers 

 verdünnt wird. 



Der Indikator für die Titrierung der Basen ist eine Auf- 

 lösung von 0-05 5^ Dimethylamidoazobenzol in 100 cms 96Voigem 

 Alkohol (nach A. Mei/er^). 



Bei Kulturen von säurebildenden Mikroorganismen bestimmt man 

 den Titer auf folgende Weise. Man mißt in ein kleines Bechergläschen mit 

 einer genauen Pipette 10 cm^ des verwendeten sterilen Xälirsubstratcs und 

 in ein gleich großes Bechergläschen 10 cm^ destillierten ausgekociiten 

 Wassers. In jede Portion kommen je 3 Tropfen der Rosolsäurelösung 

 (Indikator). Hierauf bestimmt man den Titer der sterilen Nährflüssigkeit 

 durch Zusatz von Vio Normalnatronlauge bzw. V^o Normal-Schwefelsäure, 

 die man aus einer Bürette zufließen läßt. Die Vergleichsprobe mit destil- 

 liertem Wasser, der noch 1 Tropfen Yio Normalnatronlauge zugesetzt wird, 

 ist, auf einer weißen Porzellanplatte stehend, in der Nähe zu halten. Man 

 titriert durch entsprechende Zugabe von Alkali soweit, bis das Rot der 

 neutralen Vergieichsprobe erreicht ist. Diese Titrationen sollen immer bei 

 Tageslicht ausgeführt werden. Nun notiert man den Titer der ursprüng- 

 hchen, zur Kultur verwendeten Nährflüssigkeit, indem man die zur Her- 

 stellung der Farbengleichheit verwendeten Mengen von Säure und Alkali 

 voneinander subtrahiert und die Differenz anmerkt. 



Hierauf gießt man die zu untersuchende Kultur in einen Meßkolben 

 von ÖO ciit^ Inhalt und ersetzt die verdampfte Menge Wasser, indem man 

 mit sehr kleinen Portionen von destilliertem Wasser das Kulturglas aus- 

 spült und bis zur Marke damit auffüllt. Nach Durchmischung der Kultur- 

 flüssigkeit filtriert man durch gehärtetes Filtrierpapier und entnimmt 

 10 cm^ Filtrat, das in ein gleiches kleines Bechergläschen gegeben wird, 

 wie es für die Vergleichsprobe oben genommen wurde. Nunmehr versetzt 

 man die Probe mit 3 Tropfen Rosolsäurelösung, notiert den Stand von 

 Säure und Alkali in den Büretten und fügt solange Säure und Alkali zu, 

 bis die Farbe der Vergleichsprobe erreicht ist. Die Differenz 

 der zweiten Ablesung ergibt den Säuregrad in 10 cni'^ Kultur- 

 flüssigkeit, ausgedrückt in Kubikzentimetern Vio Normalna- 

 tronlauge. Wir bezeichnen sie mit D. Jetzt muß noch der ursprüng- 

 liche Säure- bzw. Alkahgehalt der verwendeten Nährfliissigkeit in Rechnung 

 gesetzt werden. War der Nährboden sauer, muß diese Säuremenge abge- 

 zogen werden; war er alkaUsch, so ist diese Zahl hinzuzufügen. Wir be- 

 zeichnen sie mit + d und — d, entsprechend einem alkalischen oder sauren 

 Nährsubstrat. Hierauf rechneu wir den Säuregehalt noch auf 100 r»)^ 

 Kulturflüssigkeit um, indem wir die erhaltene Zaiil mit 10 multiplizieren. 

 Demnach ergibt sich nach unserem \'erfahren ein wahrer Säuregehalt in 



^) Ä. Meyer, Praktikum der botanischen Bakterieukunde. Jena. S. 96 u. f. (1903). 



