Die wichtigsten Methoden beim Arbeiten mit Tilzoii untl Bakteriou. 1 ;;();-) 



Bacillus tetani Nirolaior. 



Als Hauptfundstelle für diesen Bazillus kann Gartenerde und «ge- 

 düngtes Ackerland gelten. Die Isolierung aus den genannten Proben 

 geschieht am besten unter Einschaltung eines Tierversuches, /u dem 

 Kaninchen oder Meerschweinchen verwendet werden. Am rasierten Kücken 

 (auch Bauch) des betreffenden Tieres hebt man eine Hautfalte auf und 

 schneidet sie mit der Schere ein. Dann macht man mit einem Spatel 

 oder Glasstab eine Hauttasche, in die man einige Gramm Erde einfüllt 

 und hierauf durch eine Naht verschließt. Schon nach 1—2 Tagen zeigen 

 sich bei gelungener Infektion die ersten Tetanussymptome an den in der 

 Nähe der Impfstelle gelegenen Muskeln, die starr wei-den. Sofort nach 

 dem Tode des Versuchstieres eröffnet man den P^iterherd an der Imi)f- 

 stelle und streicht mit der Platinöse davon etwas auf schräg erstarrtem 

 Nähragar aus, entsprechend dem Verfahren von Kitasato. ») Die beschickten 

 Röhrchen werden bei 37" C 1 — 2 Tage gehalten. Diese Mischkulturen 

 werden nun ^/^ — 1 Stunde lang im Wasserbad auf 80" C erhitzt und nach- 

 her zu Gelatine- oder Agarplatten verarbeitet. Zu beachten ist. dali 

 die so von den vegetativen Bakterien gereinigton Totaiiusbazillensporen 

 in einen sauerstofffreien Nährboden kommen. Zu dem Ende werden die 

 Gelatineröhrcheu im Dampftopf unmittelbar vor der Verimpfung durch 

 V2 — 1 Stunde gekocht, dann auf 40" abgekühlt, verimpft und zu Platten 

 rasch verarbeitet. Diese kommen in den auf S. 1244 beschriebenen 

 Zuchtapparat für Anaeroben. Am besten ist es, in der Wasser- 

 stoff atmosphäre zu züchten. Das Wachstum bei 22" C auf (lelatine ist 

 sehr langsam , denn erst nach ca. 5 — 6 Tagen sind die ersten kleinen 

 Kolonien zu sehen. Dieselben sind wenig durchscheinend . im Zentrum 

 dicht und von einem feinen Strahlenkranz umsäumt. Die (ielatine wird 

 langsam verflüssigt. Von den Kolonien werden im hohen Agar Stich- 

 kulturen angelegt, die bei 37" C gehalten werden. Nach Kitasato eignet 

 sich zur Zucht besonders leicht alkalischer Nähragar mit einem Zusatz 

 von 2"/o Dextrose. Das gleiche gilt für Niihrgelatine und Bouillon. 



Zur raschen Gewinnung von Sporen in größerer Menge züchtet man 

 den Bazillus in zuckerfreier Bouillon oder auf Blutserum (vgl. 

 Lingelsheim^ Die Sporen sind sehr widerstandsfähig und halten sich, 

 vor Licht geschützt aufbewahrt, jahrelang im Laboratorium ent- 

 wicklungsfähig und virulent. Es empfiehlt sich, dieselben zur Aulhewah- 

 rung an Seidenfäden, sterilisierte Holzsplitter oder auf Filtriorpapier an- 

 zutrocknen. 



Zu Infektions versuchen eignen sich von kleinen Versuchs- 

 tieren die Maus, das Meerschweinchen und Kaninchen. Die Impfung 



1) S. Kitasato, Über den Tetanusbazillus. Zeitschr. f. Hyg. und Infoktionskrankli. 



Bd. 7. S. 225 (1889). ' 



2) V. Lingelsheim, Tetanus. KoUe und Wassermanns Handb. d. pathog. Mikroorga- 

 nismen. Bd. 2. 's. 567. Fischer, Jena (1903). 



