Die wichtigsten Methoden beim Arbeiten mit Pilzen und Bakterien. i;;il 



am besten subkutan geimpft. Sie gehen meist innerhalb 24—48 Stun(h-n 

 ein. Die Abimpfung erfolgt vom Ileizbhit. Kaninchen und Meer- 

 schweinchen impft man entweder intraperitoneal oder subkutan. 

 Auch hier gewinnt man die Kulturen wieder durch Anlegung von i'.lii!- 

 oder Milzausstrichen auf frischem, schräg erstarrtem Xähragar. 



Da sich die Bakterien der Schweineseuche gegen Austrocknung 

 empfindlich erweisen, sind öftere Überimpfungen zur Krhaltung 

 vermehrungsfähiger Kulturen notwendig. 



Im übrigen sei auf die erschöpfende Darstellung von Joest ') ver- 

 wiesen. 



Bacterium tuberculosis (Koch) Mig. 



Die Gewinnung und Isolierung geschieht entweder aus dem Sputum 

 Tuberkulöser oder aus steril entnommenen tuberkulösen Organstücken. Für 

 ersteres Verfahren kann nach Kocli eine mechanische Reinigung der Linsen 

 des Sputums in sterilem Wasser vorgenommen werden oder die von Hesse^) 

 angegebene Methode benutzt werden. Beim /vor/zschen Verfahren wird das 

 Sputum mindestens lOmal in sterihsiertem Wasser unter ständigem Wasser- 

 wechsel gewaschen und von den aus den Luftwegen und der Mundhöhle 



stammenden anderen Bakterien befreit, dann ein Stück einer Flocke mikro- 

 skopisch auf das Vorhandensein der Tuberkulosebakterien in Iteinkultur 

 geprüft. Von demselben Flöckchen wird nun ein Stückchen aus der Mitte 

 entnommen und auf eines der unten beschriebenen Nährsubstrate gebracht. 

 Bei der Hesseschen Methode bedarf es dieser Reinigung nicht. Hesse gibt 

 folgenden Nährboden an: 



Nährstoff ..Heyden" ;')•(_)// 



Kochsalz öf) y 



Glyzerin •■iOO // 



Agar-Agar L0"0^ 



Norraallösung von Kristallsoda (28"6: 100) . . 5 c;«* 

 Destilliertes Wasser 1000 cw^ 



Die Lösung des Nährstoffes „Heyden" gescliieht in einem Becher- 

 glas, in das wenig Wasser geschüttet wird. Nun wird der Nährstoff ..Heyden" 

 hineingegeben und durch Schwenken des Glases benetzt, hierauf so lange 

 gequirlt, bis derselbe vollständig gelöst ist. Diese Lösung wird dem bereits 

 samt den übrigen Beigaben gelösten Agar zugesetzt. Dann wird das Nähr- 

 substrat, in Portionen verteilt, durch angefeuchtete Filter im Dampfstrom 

 filtriert. 



Hesse gießt nun je 20 cm^ des angegebenen Nährsubstrates in J'< fri- 

 sche Schalen von ca. 9"5 cm^ Durchmesser aus und läßt Erstarren. Da- 



*) Joest, Schweincspuche. KoJh und Wassermanti, Handbuch d. puthog. Mikro- 

 organismen. Bd. 3. S. 581. Fischer, Jena (li)03). 



-) W. Hesse, Ein neues Verfahren zur Züchtung des Tuberkelbazillus. Zeitschr. f. 

 Hygiene u. lufektionskraukh. Bd. 31. S. 502 (1899). 



Abderhalden, Handbuch der biochemischen ArbeitFinethoden. m. 83 



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