1324 Franz Fuhrmann. 



Gewinnung von Spirillen. 



In der Natur kommen große Spirillen sehr häufig vor, besonders in 



Schweinejauche, in Strohaufgüssen, im Grabenwasser und im 



Sumpfwasser. Zur Anreicherung für die künstliche Kultur stellt man 

 folgende Nährlösung her i) : 



Wasser 1000 cm^ 



Calciumacetat ... 2^ 



Dikaliumphosphat . . 0"05 g 



Pepton 0-05^ 



Diese Nährlösung wird im Erlenmeyerkolben von 100 cm^ in ziem- 

 lich hoher Schicht eingegossen und mit wenig Grabenschlamm oder Sumpf- 

 schlamm beschickt. Schon nach 48 Stunden bei 32*^ C zeigt sich ein feines, 

 irisierendes Häutchen, das fast ausschließlich aus großen Spirillen besteht. 

 Man impft nun weiter auf eine Reihe von Kölbchen mit der genannten 

 Nährlösung. Nach 4 — 5 Rohkulturen schreitet man zur Reinzucht. Dazu 

 benutzt man folgenden Spirillenagar (vgl. Zettnow^). 



Agar wird in einer Menge von 8 ^ in Wasser durch 8 Tage faulen 

 gelassen und weitere 8 Tage in fließendem Leitungswasser gewaschen. 

 Verfasser gibt ihn in ein feinmaschiges Sieb, das in einer Glastasse steht. 

 ^'on oben her wird ein konstanter Wasserstrom in das Sieb laufen ge- 

 lassen. Man kocht fein gehacktes Pferdefleisch mit der gleichen Menge 

 Wasser durch 1 Stunde auf offenem Feuer , läßt auskühlen, preßt ab und 

 füllt das Filtrat auf das ursprüngliche Volumen wieder auf. Der Agar wird 

 nun auf dem Sieb vom überschüssigen Wasser befreit und in eine Mischung 

 von 125 cni^ obigen Fleischwassers, 125 cm^ Wassers und 0'5^ Pepton ein- 

 getragen und im Dampftopf zur Lösung gebracht. 



Nun stellt man sich ein P/o ige Lösung von Ammonsulfat, eine 

 17oi&e Lösung von Kaliumnitrat und eine ö^/oige Lösung von 

 Calciumlaktat her. Man mischt 90 crn^ vom obigen Fleischwasser- 

 peptonagar mit IS cm^ der Kaliumnitratlösung, 18 cm^ der Ammon- 

 sulfatlösung und f)4, cm'^ der Calciumlaktatlösung und setzt soviel 

 Natronlauge zu, bis Lackmus deutlich gebläut wird. Nach Abkühlung des 

 Nährbodens auf 50" C werden 20 cm» einer 5"/oigen Eieralbuminlösung 

 zugesetzt. Hierauf erhitzt man im Dampfschrank durch 40 Minuten und 

 filtriert. Der in Röhrchen abgezogene Agarnährboden wird zu Platten ver- 

 arbeitet, die mit einer Aufschwemmung der aus den Anreicherungskulturen 

 gewonnenen Spirillen in sterilem Wasser übergössen werden. Der Über- 

 schuß der Bakterienemulsion wird sofort wieder abgeschüttet und der 

 Schalenrand mit einem in Alkohol getränkten und gut ausgedrückten 



^) G. van ItersoH , The decomposition of cellulose by aerobie microorganisms. 

 Kon. Akad. van Wettenskappen te Amsterdam, p. 685 (1903). Ref. Kochs Jahresber. 

 1903. S.460. 



^) Zettnow, Nährboden für Spirillum Undula majus. Zentralbl. f. Bakt. I. Abt. 

 Bd. 19. S. 393 (1896). 



