Die Technik der Gewebskultur in vitro. y39 



von oT'' bis 39" C entweder flüssig oder fest. Leuis^) benutzte einen 

 Kultnrnährboden, der aus einer Lösung nach Locke aus Agar-Agar und 

 Bouillon bestand. Wir verwenden meistens >s'ährböden analoger Zusammen- 

 setzung, bei welcher ein AVachstum der embryonalen (jcwebe vor sich geht. 

 Die Zusammensetzung ist folgende : 



Natriumchlorid OÜ 



Calciumchlorid 0-024 



Kaliumchlorid 0*04:2 



Glukose 0-1 



Agar 3 



Destilliertes Wasser . . . .100 



Zuweilen fügen wir dieser Mischung noch 0'02 Natriumkarlionat oder 

 Natriumphosphat hinzu. 



Die Zusammensetzung der Nährböden kann in mannigfaltiger Weise 

 modifiziert werden, indem man die verschiedenen Salzmengen ändert. In 

 einem Nährboden, der nur aus Calciumchlorid , Natriumchlorid und Agar- 

 Agar besteht, entwickeln sich gewisse Embryogewebe, wenigstens während 

 einer kurzen Periode, sehr gut. 



Für die am meisten angewandten flüssigen Nährl)öden kommen fol- 

 gende Lösungen in Betracht: die Lösung nach Locke, oder die Binf/ersche 

 Lösung, eine Lösung von Natriumchlorid in destilliertem Wasser oder 

 Serum, das aus dem Blut oder aus dem Plasma eines Tieres stammt, das 

 entweder derselben Art angehört, wie dasjenige, welches das Gewebe ge- 

 liefert hat; oder einer anderen Art. 



II. Präparieren der Gewebe. 



Die Gewebsfragmeute, welche als Aussaat dienen, müssen mit sehr 

 grol'jer Sorgfalt vorbereitet werden. Ihr Wachstum wird außerordentlich 

 beeinflußt durch die Art ihrer Abtrennung (Abschneidung), durch die Länge 

 der Periode , die sich seit dem Aufhören des Blutkreislaufes bis zum Be- 

 ginn der Kultur erstreckt, durch den Grad und die Dauer der Abkühlung usw. 

 Die Gewebe wei'den dem Tiere während des Lebens oder sofort nach dem 

 Tode exstirpiert. In den Kulturen von menschlichen Geschwülsten bringt 

 man das Gewebe so schnell als möglich nach der Exstirpation in den Kultur- 

 nährboden. Jedoch können die Gewebe, ehe sie kultiviert werden, auch 

 einige Zeit lang im Zustand des latenten Lebens erhalten werden, hie Leber 

 und die Hornhaut (Cornea) eines menschlichen Fötus, die . HO Stunden lang 

 im Eisschrank aufbewahrt wurden, ergaben noch ein schwaches Wachstum 

 der Zellen. Wir bewahrten ferner Teilchen der Milz vom Ilühnchenembryo 

 72 Stunden lang im Eisschrank auf und konnten beobachten, daß diese 

 Fragmente, in Plasma eingesät so reichlich, wie frisches Gewebe, wuchsen. 

 Sicherlich konnte die latente Periode noch leicht verlängert werden. 



M Leids, The growth of omhryoiiic chick tissiies in artificial media, agar and 

 liouillon. Bnll. of the .Johns Hopkins Hospital. 1911. p. 126. 



