qj.Q Haus Prinixslieim. 



tronnuiig der Fermente anbetrifft . so hat die Buchnersche Preßsaftmetliode 

 ihre Versprechungen nicht ganz gehalten, da bisweilen einzelne Fermente 

 nicht in den Saft übergehen , sondern im Preßkuchen zurückgehalten 

 werden. ^) Man verwendet deshalb einfacher die feuchten Mikroorganismen 

 als solche, die man auf die lOVoigen Zuckerlösungen in Gegenwart von 

 Toluol 48 Stunden bei Bruttemperatur einwirken läßt. Die von den Mikro- 

 organismen dui'ch Filtration z. B. über Kieseiguhr befreite Lösung wird 

 mit 1</ kristallisiertem Natriumazetat pro 1 </ verwandten Zucker versetzt, 

 auf dem "Wasserbade erwärmt und nach Zusatz von wenig reiner Tier- 

 kohle filtriert. Durch diese Operation werden die Proteine zum größten 

 Teil entfernt. Dem klaren Filtrat wird auf ein Teil Zucker 2 Teile Phenyl- 

 hydrazinchlorhydrat (das durch Umkristallisieren aus Alkohol reinweiß er- 

 halten wird) und o Teile kristaUisiertes Natriumazetat zugegeben und im 

 Wasserbade, d. h. direkt im kochendem Wasser V/^ Stunden erhitzt. Nach 

 einstündigem Stehen in der Kälte werden die Osazone abgesaugt, mit 

 kaltem W^asser gewaschen und mit etwa 40 Teilen Wasser (auf den 

 Zucker berechnet) ausgekocht, kochend heiß filtriert und mit wenig heißem 

 Wasser gewaschen. Hierbei verbleiben auf dem Filter, wenn Spaltung ein- 

 getreten ist, bei Maltose und Zellobiose Glukosazon, bei Milchzucker und 

 Melibiose ein Gemisch von Glukosazon und Galaktosazon , endUch bei 

 Kaffinose, je nach der Spaltung, die z.B. bei Schimmelpilzen in ver- 

 schiedener Richtung erfolgen kannM, (Glukosazon, Galaktosazon oder ein 

 Gemisch dieser beiden , wenn nämliche Spaltung in die drei Monosaccharide 

 eingetreten ist. Spaltung in Fruktose und Melibiose gibt sich hier dadurch 

 zu erkennen, das nach dem Auskochen der Osazone im Filtrat Melibio- 

 sazon ausfällt. Außerdem werden die unlöslichen Osazone aus öOVoigem 

 Alkohol umkristallisiert und durch ihren Zersetzungspunkt geprüft, ob 

 Glukosazon oder Galaktosazon vorlag. 



Die in heißem Wasser unlöslichen Osazone kann man nach dem Trocknen 

 bei 100° zur Wägung bringen; ihre Menge ermöglicht eine annähernde Be- 

 urteilung des Grades der Spaltung. 



2. Der Grad des Abbaues. 



Quantitativ läßt sich die Spaltung mit einiger Leichtigkeit nur 

 beim nicht reduzierenden Ptohrzucker verfolgen. '-) Handelt es sich um die 

 Spaltung reduzierender Disaccharide in reduzierende Monosaccharide, so 

 muß man sich zur Verfolgung des Spaltungsgrades durch die Reduktions- 

 kraft einer empirisch zusammengestellten Tabelle bedienen, da das Re- 

 duktionsvermögen durch die Anwesenheit verschiedener reduzierender 



') //. Pringsheim und G. Zemplen, Studieu über die Polj'saccharide spaltenden 

 Fermente in Pilzpreßsäfteu. Zeitschr. f. pliysiol. Chemie. Bd. 62 (1909). S. 367. 



") Tgl. Tollens, Dieses Handbuch. Bd. II. S. 145. Genauere AuEraben in E. r. Lipp- 

 mann, Chemie der Zuckerarten. Bd. I. S. 936. Braunschweig. Vieweg & Sohn. 1904. 



