954 Hans Pringsheim. 



Xeuestens hat Amann i) eine Methode zur direkten Bakterienzählung 

 im Ultramikroskop angegeben, die ganz dem Hefezähhmgsverfahren ent- 

 spricht. 



Verfolgung des Stickstoff verbrauches und des S tickstoffaus- 



trittes. 



"Wie schon erwähnt und im Folgenden noch begründet werden wird, 

 findet bei der Gärung der Hefe ein Austritt von Stickstoff aus der Zelle 

 statt. Diese Erscheinung wird wohl eine allgemeine sein, die mit dem 

 Wachstum und der Lebenstätigkeit der Mikroorganismen in stickstoff- 

 haltigen Nährlösungen Hand in Hand gehen muß. Ebenso wie bei höheren 

 Lebewesen ist also auch hier das Leben an einen Stickstoffumsatz ge- 

 bunden. Diese allgemein interessante Frage verdient eine weitere Bear- 

 beitung. 



Aus dem Gesagten geht klar hervor, daß sich aus dem Gehalt der 

 Zellen an Stickstoff nichts über die Stickstoffaufnahme aus der Nähr- 

 lösung sagen läßt. Auch die Bestimmung der zurückgelassenen Menge an 

 Stickstoffnahrung stößt bei den meisten Stickstoffquellen, wie Eiweiß, Pepton, 

 auch bei Aminosäuren auf unumgängliche Schwierigkeiten, wozu noch kommt, 

 daß gerade diese Bindungsformen des Stickstoffs aus der Zelle ausgeschieden 

 werden. Günstig hegen allein die Verhältnisse beim Ammoniak, und zwar 

 auch nur dann, wenn die in Frage kommende Mikroorganismenform keine 

 Ammoniakanhäufung während ihres Wachstums bewirkt. Davon kann man 

 sich durch Züchtung auf ammoniakfreien Nährböden überzeugen. Außerdem 

 käme noch die Ernährung mit Salpeter in Betracht, der zwar schwerer zu 

 bestimmen ist, aber nie. von nitrifizierenden Organismen abgesehen , ein 

 Dissimilationsprodukt sein wird. 



Hefe nun spaltet kein unverbrauchtes Ammoniak ab. Man kann mit 

 ihr zur Ermittlung des Stickstoff Umsatzes also wie folgt verfahren. Eine 

 Nährlösung von bestimmtem Ammoniakgehalt wird mit Hefe beimpft. Den 

 Ammoniakverbrauch bestimmt man nach Destillation mit gebrannter Mag- 

 nesia, wodurch die anderen Stickstoffsubstanzen kein Ammoniak verlieren, 

 durch Titration. Mit Lakmoid als Indikator ist es nötig, die saure Flüssig- 

 keit in der Vorlage aufzukochen, um einen scharfen Umschlag zu erhalten. 

 Den Stickstoffgehalt der Hefe ermittelt man nach Kjchldahl. Man findet 

 dann als Differenz des Ammoniakverbrauchs und des Stickstoffgehaltes der 

 Hefe die aus den Zellen ausgetretene Menge Stickstoff, während Wachs- 

 tum (und Gärung). Folgende Daten geben ein Beispiel für einen derartigen 

 Versuch -) : 



') H. Amann , Die direkte Zählung der Wasserbakterien mittelst des Ultrami- 

 kroskops. Zentralbl. f. Bakt. II. Abt. Bd. 29 (1911). S. 381. 



-) //. rrwf/sheim, Der Einfluß der Stickstoffornühruug der Hefe auf den Ver- 

 mehrungsgrad, die Gärwirkung und den Stickstoffumsatz während der Gärung. Biochem. 

 Zeitschr. Bd. 3 (1907). S. 198. 



