QQ^ Hans PringBheim. 



Um diese Bestimmungen in Lösungen vorzunehmen, die viel orga- 

 nische Substanz enthalten, z. B. in Bouillonkulturen, muß man dem kolloi- 

 dalen Ausfallen des Nitronnitrats dadurch vorbeugen, daß man zu je 200 cm^ 

 Flüssigkeit 2 — 2V2 c"^' konzentrierte Schwefelsäure zusetzt. 1) 



Anhäufung denitrifizierender Bakterien. 



Nach dem von Fuhrmann (Bd. III, S. 1317) angegebenen Verfahren 

 gelangt man zu Kulturen von Bacterium Stutzeri. Verwendet man an Stelle 

 des Kalziumtartrats 2«/o Kalziumzitrat , so gewinnt man den Bacillus 

 denitrofluorescens. — Die Anhäufung des Bacillus vulpinus gelingt vermöge 

 seines etwas größeren Sauerstoffbedürfnisses dadurch, daß man die zu ver- 

 wendende Kulturflasche von 50 cm» mit 1—2^ Gartenerde beschickt und 

 so weit mit der Nährlösung anfüllt . daß 2 cni^ Luft darin bleiben. — Von 

 besonderem Interesse sind noch Bakterien, welche die Kohlensäure durch 

 Denitrifikation mit freiem Schwefel als Energiequelle reduzieren. Alan füllt 

 eine gut schließende Stöpself lasche ganz mit folgender Nährflüssigkeit: 



Grabenwasser 100 



Schwefel als Pulver .... 10 



KNO3 005 



Na,C03 0-02 



CaCOg 2 



K2HPO4 002 



und kultiviert bei 30». Nach 5 — 6 Tagen beginnt eine regelmäßige Stick- 

 stoffentwicklung, worauf in dieselbe Kulturflüssigkeit, in der das Graben- 

 wasser durch destilliertes Wasser plus 0-01 g MgCl, entsetzt ist, überge- 

 impft mrd. Bei dem Vorgang wird der Schwefel in Sulfat umgewandelt. 

 Der hier wirksame Thioliacillus denitrificans kann auf Agar mit derselben 

 Lösung gut in Beinkultur gewonnen werden. Veranlaßt durch die An- 

 wesenheit intermediär gebildeten Schwefelwasserstoffes tritt bei dem Ver- 

 such noch eine andere Bakterienart auf, die an und für sich nicht denitrifi- 

 ziert. Bei Ersatz des Schwefels durch Natriumthiosulfat wird auch sie in 

 Reinkultur gewonnen und dadurch von der erstgenannten Art unterschieden, 

 daß diese große, dünne, glashelle, schwierig sichtbare, mit Schwefeltröpfchen 

 durchsetzte Anflüge erzeugt, während die zweite Form, T. thioparus, 

 kleine, runde, wie trockener, gelber Staub aussehende Kolonien bildet. 



Die Anhäufung zellulosezersetzender denitrifizierender Bakterien ist 

 schon unter Zelluloseabbau (S. 934) beschrieben worden. Die Gewinnung 

 denitrifizierender Meeresbakterien kann hier nicht im Detail wieder- 

 gegeben werden. 2) 



*) H. Franzen und E. Löhmann, t)ber die Verwendung des Nitrens zur Bestim- 

 mung der Salpetersäure in Flüssigkeiten, \Yelche viel organische Substanz enthalten. 

 Journ. prakt. Chem. N. F. Bd. 79 (1909). S. 330. 



-) //. H. Gran, Studien über Meeresbakterien. I. Reduktion von Nitraten und 

 Nitriten. Bergens Museum Aarbog. 1901. Nr. 10. Ökologie. S. 205. 



