Methodik der Stoffwcchseluntersuchung bei Mikroorganismen. Og7 



ZU isolieren, muß man daher eine Prüfung- auf (•licinisclu'iii Wej^e vor- 

 nehmen. Man prüft auf Ammoniak mit dem AVi-.s/er.schen Keaffcnz. auf 

 Nitrit mit dem TrommsdorJ/'i^dwn (/inkjodidstärkclösiin^j nnd anf Xiti'it 

 und Nitrat mit Dipheuvkimin-SchwefeLsäure. Am he.sten verwendet man 

 für die Tüpfeh-eaktionen PorzelJanphitten mit schalenarti}j;en Vertiefnnj^en. 

 In jede Vertiefung gießt man l—i^/^cm^ des Reagens mit je ein paar 

 Tropfen verdünnter Schwefelsäure. Bringt man dazu je eine l'latinöse Knltnr- 

 flüssigkeit, so breitet sich etwa am 4. Tage im TrommsdorJ/ i^chcn Pieageus 

 von der P)erührungsstelle aus ein blauer Schleier aus. Die Intensität der 

 Reaktion nimmt in den nächsten Tagen zu, bis an der P>erührungsst('lle 

 ein gesättigter dunkell)lauer Fleck entsteht, der sich über die ganze (Jber- 

 fläche ausbreitet. Man beginnt dann mit dem AV.ss/crschen Reagens in 

 derselben Weise, das zu dieser Zeit noch einen deutlich gelben Fleck gibt, 

 der allmählich heller wird und schließlich verschwindet. Ehe dieser Punkt 

 erreicht ist, ist natürlich die Zeit zum Überimpfen für die Nitritl)ildner 

 gekommen, denn jetzt wird die Diphenylaminreaktion positiv, auch wenn 

 man etwa vorhandenes Nitrit durch Kochen mit Harnstoff in saurer Lö- 

 sung zerstört hat, denn die Nitritbildner sind in Erscheinung getreten. Diese 

 kann man sich auf einfachere Weise dadurch anhäufen, daß man das Ammon- 

 sulfat von vornherein durch ein pro Mill. salpetrigsaures Natrium ersetzt, 

 wobei schon nach zwei Umimpfungen alle ammonoxydierenden Organismen 

 aus der Kultur verschwunden sind. Bezüglich der ^Morphologie der P.ak- 

 terien vgl. man die Winogradski/sche Abhandlung, die ausgezeichnete Photo- 

 gramme enthält. 



Reinkultur. 



Nitritbildner: Die Plattenkultur gelingt weder auf (ielatine noch 

 auf gewöhnlichem Agar, weil der Gehalt an Kohlenstoffsubstanzen hindernd 

 wirkt. Man verwendet Kieselsäuregallerte. 



Zur Bereitung der löslichen Kieselsäure mischt man gleiche 

 Raumteile Wasserglas (vom spez. Gew. 1-05 — 1'06) und Salzsäure (spez. 

 Gew. 110), indem man die Wasserglaslösung in die Salzsäure eingießt. Gb 

 Kali- oder Natronwasserglas verwendet wird, ist gleichgültig, nur muß es 

 farblos und klar sein, sonst bekommt man keine haltltare Kicselsäurelösung 

 nach dem Dialysieren. Die Dialyse wird in Pergamentpai)ierschläuchen 

 vorgenommen, deren Zustand vorher genau auf Durchlochungen zu i^rüfen 

 ist: man klemmt das eine Ende des Schlauches mit einer Schraubenklemme 

 fest, füllt den Schlauch mit Wasser und hängt ihn in vertikaler Riclitnng 

 auf. Nur solche Schläuche sind tauglich, die an der Oberfläche keine Spur 

 einer Durchsickerung von Wasser merken lassen. Schnelle Dialyse ist für 

 die Haltbarkeit der (iallerte wichtig, weshalb man nur kleine Mengen auf ein- 

 mal dialysiert. Gewöhnlich genügt es, einen Tag lang gegen scimell fließen- 

 des Leitungswasser und einen Tag gegen :■>— 4mal gewechseltes destilliertes 

 Wasser zu dialysieren. .Die Dialyse ist fertig, wenn man mit Silbernitrat 

 höchstens ganz geringe Trübung erhält. Die Lösung ist in .»sorgfältig ge- 



