Die gasometr. Bestimmung von primär, aliphatisclien Aminostickstoff etc. lOOSJ 



tion selbst bei Gegenwart von reagierenden Aminosäuren (durch den groben 

 Überschuß von Nitrit wird die Konzentration desselben nahezu konstant ge- 

 halten). Dieser Umstand ermöglich esi), die Besti luiig des Amino- 



siiurestickstoffs vorzunehmen, ohne den Harnstoff vorher zu entfernen, so 

 dab also eine hydrolytische Behandlung unnötig ist. Die so erhaltenen Re- 

 sultate sind natürhch nicht an Genauigkeit mit denjenigen vergleichbar, die er- 

 zielt werden, wenn der Harnstoff vorher entfernt worden ist. Sie -ind 

 aber doch bis O'S^/o des Gesamtstickstoffs des Urins zuverliissig und ge- 

 nügend, um irgend eine erhel)liche Vermehrung des Aminostickstoffs nach- 

 zuweisen. Die Methode wird, wie folgt, ausgeführt: 



100 cm^ Urin werden mit 4: g Natriumhydrat versetzt und mittelst 

 mehrstündigen Durchleitens eines kräftigen Luftstroms vom .Vmmoniak 

 befreit. Es ist ziemlich schwierig, das Ammoniak auf diese Weise voll- 

 ständig zu verjagen. Die zurückbleibenden Spuren beeinflussen aber die 

 Resultate nicht merklich, denn das Ammoniak reagiert mir langsam mit 

 salpetriger Säure, und infolgedessen wird es fast vollständig mit <hMii 

 Harnstoff anstatt mit den Aminosäuren bestimmt. 



Nachdem das Ammoniak entfernt worden ist. wird der Urin mit 

 Essigsäure angesäuert, auf dem Wasserbade konzentriert un<l schlieljjich 

 auf ein Volumen von 50 cm^ gebracht. Mit je 10 cm'^ führt man zwei 

 Aminobestimmungen aus, und zwar die eine genau im Verlauf von sechs 

 Minuten, die andere während zwölf Minuten, gerechnet von dem Zeitpunkte, 

 bei dem der Urin mit der salpetrigen Säure gemischt wird. Bei diesen 

 Bestimmungen läßt mau die Lösungen 5 und 11 Minuten lang ruhig 

 stehen und schüttelt erst während der letzten Minuten um. Der Unter- 

 schied zwischen den beiden Piesultaten repräsentiert die Menge Stickstoff, 

 die vom Harnstoff während 6 Minuten abgegeben worden ist. Duich 

 Subtraktion dieser Differenz von dem Ergebnis, das man bei der Bestim- 

 mung in 6 Minuten erhalten hat, wird die Stickstoffmeuge, die aus den 

 Aminosäuren stammt, gefunden. 



Für die Genauigkeit des Verfahrens ist es wichtig, dal) genau die- 

 selben Volumina alP dei' erforderlichen Lösungen bei beiden Amino- 

 bestimmungen benutzt und daß l)eide bei gleicher Temperatur ausgeführt 

 werden. Mit besonderer Sorgfalt muß man auch darauf achten, daß. nach- 

 dem die Luft im Apparat durch Stickoxyd während des ersten Stadiums 

 der Bestimmung vertrieben worden ist, dasselbe Volumen von salpetriger 

 Säurelösung in der Zersetzungsflasche {D in der Fig.2)>l ) hinterbleibt. Dies 

 \\'ird leicht so bewerkstelligt, daß man die Lösung aus D in den Zylimler 

 Ä genau bis zur Marke von 25 cm^ zurücktreibt, ehe der Urin in /> ein- 

 gelassen wird. 



Falls die Temperatur unter 11)" ist, muß die Zeit der Reaktion auf 

 7 und 14 Minuten ausgedehnt werden und bei einer Temperatur unter 

 150 auf 8 und 16 Minuten. 



\) Dieser Gedanke wurde zuerst von Dr. 7'. .1. Lerem ausgesprochen. 



Abderhalden, Handbuch der biochemigchen Arbeitsmethoden. V. 64 



