IIQQ A. B. Macallum. 



Beispiel bildet die Hämatoxylinreaktion auf Eisen. Die Verbindungen des 

 letzteren sind in den Zellen gewöhnlich von unlöslicher Art und so wird 

 bei alkoholgehärteten Prcäparaten solcher Zellen die Verteilung verhindert, 

 welche während des Lebens statthat. Solche Verbindungen werden durch 

 das Hämatoxyhn nicht verändert; sie verändern aber mehr oder weniger 

 langsam dieses Produkt, indem sie es in eine tief gefärbte unlösliche Sub- 

 stanz verwandeln, welche auch genau dort, wo sich jene Verbindungen be- 

 fanden, auftreten. Eine solche Reaktion steht indessen einzig da und daher 

 wird die allgemeine Forderung für die biologische Mikrochemie, daß die 

 betreffende Reaktion wenigstens annähernd augenbUcklich eintreten sollte, 

 nicht beschränkt. 



Eine andere Schwierigkeit liegt in der Undurchlässigkeit der Zellen 

 und Gewebe, wodurch das schnelle Eindringen der Reagenzien, sei es im 

 ganzen oder nur des einen oder anderen Bestandteiles derselben erschwert 

 wird. Während des Lebens der Zellen schränkt diese mehr oder weniger 

 große Undurchlässigkeit die Austauschmöglichkeit zwischen dem Inneren 

 und der Außenwelt ein und die Reagenzien, die bei mikrochemischen 

 Methoden gebraucht werden, sind von diesem Einfluß nicht völlig ausge- 

 nommen. Ehe ein Reagens imstande ist, in das Innere einer Zelle in ge- 

 nügender Weise einzudringen, um überhaupt die erforderliche Reagenz- 

 wirkung hervorzubringen, können Diffusionsströmungen vor sich gehen, die 

 bewirken, daß die Reaktion, welche zuletzt stattfindet, nicht die ursprüng- 

 liche Verteilung der Bestandteile der Zelle veranschaulichen. Diesen stören- 

 den Einfluß gänzlich zu beheben ist unmöglich. Man kann nur darnach 

 streben, ihn so einzuschränken, daß das Resultat nicht weiter beeinflußt 

 wird. Zu diesem Zwecke muß man die Reagenzien in der Weise zu den 

 isoherten Zellen bringen, daß alle Teile jeder einzelnen ZeUe auf einmal 

 erreicht werden. Bei den isolierten Zellen kann ein Reagens unter ge- 

 wöhnlichen Umständen so rasch durchdringen , daß die Wiederverteilung 

 seiner Salze bis auf ein Minimum eingeschränkt bleibt. 



Es ist indessen hin und wieder nötig, die Verteilung eines Elementes 

 oder einer Verbindung sowohl unmittelbar ohne Zelle, als auch in der 

 Zelle zu kennen. Natürlich ist die Isolierung der individuellen Zellen eines 

 Gewebes hier ohne Nutzen, denn diese ruft neue außerzellulare Bedingun- 

 gen hervor und verändert so die Zusammensetzung an der Oberfläche der 

 Zelle. Um dies so viel wie möglich zu vermeiden, müssen kleine Partikel- 

 chen frischen Gewebes von einem Durchmesser von nicht mehr als 20 y. 

 angewandt werden. Zu diesem Zwecke wird das Kältemikrotom gebraucht, 

 und die Teilchen werden, während noch flach und gefroren, sogleich mit 

 dem Reagenz zusammengebracht. Das letztere gelangt auf diese Weise 

 zu allen Teilen der Schnitte und auch fast ebenso schnell in das Innere 

 der Zellen und selbst zum Kern. 



Gegen diese Methode kann allerdings eingewandt werden, daß das Ge- 

 frieren die Verteilung der Salze in den Geweben verändert. Das Gefrieren 

 beeinflußt nämlich etwas die Lokalisierung der Salze in den Zell dementen, 



