Die Methoden der Itiologisclien Mikrocliemie. 1111 



gegossen, und es wird \vieder absoluter Alkoliol zugesetzt. Nach nochmals 

 24 Stunden wird der ülierstehendc Alkohol abgegossen und durch frischi-n 

 absoluten Alkohol ersetzt. Diesen lälit man imii zwei Tage lanL»^ einwirken. 

 Die geliiirteten Organismen werden jetzt mit einei- rij)ette, und zwar mit 

 einer möglichst geringen Menge Alkohol aufgenommen unil tropfenweise 

 auf den Objektträger gebracht. Nachdem der Alkohol zum {.'röl'.ten Teil 

 verdunstet ist, fügt man das Sulfidreagens und das (ilyzeiin hinzu, bedeckt 

 mit einem Deckgläschen und bringt nun das Präparat in einen auf ♦•()" 

 erwärmten Trockenkasten, damit die Reaktion mit dem organischen Kisen 

 eintreten kann. Hierzu sind Tage erforderlich, l'm das M;i\imMm der ili'- 

 aktion zu erreichen, können selbst zwei Wochen vergehen. 



Bei größeren Organismen kann die Entwicklung der Keaktioii auf 

 organisches Eisen viel längere Zeit in Anspruch nehmen, als es bei kleineren 

 Organismen der Fall ist. Dies beruht auf dem geringeren KindriuLMinirsver- 

 mögen des Keagens. Bei homogenen Membranen wird die Diffusion in den 

 gehärteten Organismus verhindert und die Reaktion tritt üi)erliaupt nicht 

 ein. Dies letztere ist der Fall bei Vaucheriapräparaten und häufig bei 

 Cladophora- und Spirogyrapräparaten. Wenn jedoch die Kerne und 

 andere eisenhaltige Teile des Zytoplasmas in diesen Präparaten aus der 

 einschhelJenden Membran, durch Bruch derselben, in Freiheit gesetzt werden, 

 wird die Reaktion ohne Schwierigkeit oder ohne besonderen Aufschub 

 erhalten. 



Zuweilen ist es vorteilhaft, das organische Eisen in Schnitten (von 

 5—10 i>^ Dicke) des alkoholgehärteten Gewebes im ganzen nachzuweisen. 

 Zu diesem Zwecke werden die Schnitte 1 — 4 Taye lant^- in schwefelsäure- 

 haltigem Alkohol, der aus 4 Vol. reiner konzentrierter Schwefelsäure (sjiez. 

 Gew. 1-84) und 100 Vol. absolutem Alkohol besteht, gelegt. Die mit (das- 

 stopfen verschließbare Flasche, in der Flüssigkeit und Schnitte aufbewahrt 

 werden, mul'. natürlich vorher zur Entfernung jeder Spur v(tn Eisen 

 sorgfältig gereinigt werden. Die Temperatur während des Härtungspro- 

 zesses soll andauernd 35—40» C betragen. Die Säure setzt das Eisen lanir- 

 sam aus den vorhandenen, organischen Verbindungen in Freiheit. Der 

 Säurealkohol extrahiert das Eisen aus den Schnitten allerdings lanirsamer, 

 als es in Freiheit gesetzt wird. Am Ende des zweiten Taires hat die Re- 

 aktion gewöhnlich ihr Maximum erreicht, und die Schnitte könni'u jetzt 

 nach der einen oder der anderen Weise zum Nachweis des in Freiheit 

 gesetzten Eisens behandelt werden. Nach dem einen \ eifahren werden die 

 Schnitte mit absolutem Alkohol gewaschen, um jede Spur Säure zu ent- 

 fernen, dann 24 Stunden lang in einer 0-5«/oigen Hämatoxylinlösung be- 

 lassen, hierauf mit Alkoliol entwässert, mit Xylol ireklärt und in Balsam 

 eingebettet. Nach dem anderen Brozeli bringt man die Schnitte sofort für 

 eine halbe Stunde lang in eine frisch bereitete Mischun;:: gleicher \'olumina 

 O-öVoigei" Salzsäure und l'öo/oiger Ferrocyankaliundösunir. wasciit sie 

 darauf sorgfältig mit destilliertem Wasser, färbt sie mit Eosin, entwässert 

 und bettet dann in beschriebener Weise ein. Die Kontrastfärbung mittelst 



