Die Methoden der biologischen Mikrochemie. 1119 



von Octopus nachweisen. A. B. Marnllum konnte es elien.'^owonifi: in 

 den Musiveln dQs Ilunimer.s und der Krahhe auffiiideii. 



Da der mit dem Koljaltdoppel.salz, CoNa. (N(),)n. erzeii^^te Kreatin- 

 niedersclila»- viel leiciiter löslieh ist als die Kalium verllindunjL,^ so kann man 

 aus Muskelfasern, in denen man eine Fällunf,^ vorj,n'nommen hat, das Kreatin- 

 salz, zum größten Teile wenigstens, durch häufiges Waschen mit eiskaltem 

 Wasser entfernen. Das letztere i.'^t jedoch hei Untersuchung von Muskel- 

 fasern der Vertebraten nicht unbedingt nötig, denn das Kreatin und Ka- 

 hum finden sich in diesen Geweben in ganz iihnlicher Weise verteilt. 



Die Form der Kristalle und die orangegelhe l-'arbe des Kaliumsalzes 

 erleichtern seineu Nachweis außerordentlich , wenn es in den /ii unter- 

 suchenden Geweben in bemerkenswerten Mengen vorhanden ist. Wenn es 

 dagegen in sehr geringen Mengen oder nur in Spuren in einem (Jewehe 

 oder in einer Zelle auftritt, bleibt der kristallinische Niederschlag aus und 

 es ist auch mögUch, daß selbst keine gelbe Färbung zu beobachten ist. 

 Man muß daher dann eine etwas andere Methode anwenden, um die Gegen- 

 wart des Kobaltsalzes deutlich nachweisen zu können. Eine solche Methode 

 wurde von Macallum aufgefunden. Sie besteht in der Anwendung einer 

 sauren Ammoniumsulfidlösung (1 Teil Sulfidreagens und 1 Teil Wasser), 

 die mit dem Kobalt augenblicklich unter Bildung von schwarzem Koijalt- 

 sulfid reagiert. W^enn also nach solcher Behandlung in einem Gewebe die 

 schwarze Fällung auftritt, so ist dadurch bewiesen, daß KaliumsaLc vor- 

 handen war. Da der schwarze Niederschlag sehr leicht wahrzunehmen ist, 

 so ist es daher auch nicht schwer, sich über Vorkommen und Verteilung 

 selbst von Spuren von Kalium zu vergewissern. 



Das Kobaltreagens muß bei der Untersuchung von Zellen und (ie- 

 weben in der Weise gebraucht werden, daß es auf einmal in alle Teile der 

 betreffenden Präparate eindringen kann. Bei einzelligen Organismen, 

 wie bei Infusorien oder Hefezcllen, ist dies leicht zu bewerkstelligen. 

 Die Flüssigkeit, in der sie sich befinden, wird mit ungefähr zwei 

 Volumina des Reagenzes gemischt und die Masse dann wenigstens 

 eine halbe Stunde, aber nicht länger als zwei Stunden, stehen ge- 

 lassen. Durch diese Behandlung wird die erwünschte Wirkung, die Zellen 

 zu fixieren, erreicht. Das Eindringen des Keagenzes und die FiUlung des 

 Kaüumsalzes sind bereits in weniger als Va Minute, in einigen Sekuntlen, 

 vollständig erfolgt. Die Mischung wird nun ungefähr fünf Minuti'u lang 

 zentrifugierti), dann wird die überstehende Flüssigkeit abgegossen, mit 

 eiskaltem Wasser versetzt, wieder drei Minuten lang zentrifugiert. worauf 

 die Flüssigkeit wieder abgegossen wird. Dieser Prozeß wird 4- oder önial 

 wiederholt. Wenn dann das Kobaltreagens auf diese Weise völlig entfernt 

 worden ist, wird der Niederschlag mit der ö- oder ♦'.fachen Menge seines 

 Volumens absoluten Alkohols Übergossen und zur vollständigen Härtung so 



') Zu diesem Zwecke genügt eine kleine Zentrifuge, wie man sie zur Trennung 

 des Salzes und der Kristalle im Urin benutzt. 



