Die Methoden der biologischen Mikruchoniie. 1 ll'l 



es hier gut auseinander. Nachdem das Ilea'-ens 7, Stunde auf die isolierten 

 Fasern eingewirkt hat, gießt man den Cberschulj der Kohaltlüsung ah und 

 fügt eiskaltes Wasser hinzu. Nach 5 Minuten wird dies elienfalls abge- 

 gossen und durch frisches eiskaltes Wasser ersetzt. .Man wiederholt diese 

 Operation 4— ömal oder bis das Waschwasser endlich farblos erscheint, 

 d. h. bis es auf Zusatz einiger Tropfen Ammoniunisulfids keine Reaktion 

 auf Kobalt melir gibt. Das rückständige Zellenmaterial wird dann mit einer 

 ripette aufgesaugt und auf einen Objektträger gebracht: man versetzt 

 hierauf mit einem Tropfen der Glyzerin-Ammoniumsulfidmischung, bedeckt 

 mit einem Deckgläschen und untersucht. 



Liegen einzellige Organismen vor, so verliert man durch das be- 

 schriebene Dekantieren mit Wasser einen groIJen Teil der kleineren (Je- 

 w^ebspartikelchen. Um dies zu verhüten, kann man sich mit \orteil einer 

 Zentrifuge bedienen. Durch wiederholtes Zentrifugieren mit eiskaltem 

 Wasser, das nach jeder Drehungsperiode, die 3 — 5 Minuten lang dauern 

 soll, erneuert wird, erhält man schlielihch ein Sediment, von dem man 

 mittelst der Pipette genügend charakteristische Gewebsproben zum Einlegen 

 in die Glyzerinsulfidmischung entnehmen kann. 



Nach der beschriebenen Methode kann man in den isolierten Zellen 

 und Gewebsteilen ziemlich genau die Verteilung der Kalinmsalze itestimmen. 

 Aber wenn die Präparate als gänzUch typisch (natürlich) gelten sollen, so 

 kann man gegen die erw^ähnte Art der Präparierung einen ernsthaften 

 Einwand erheben : auf der Oberfläche der isolierten Zellen und Fasern hat 

 nämlich das Fluidum nicht dieselbe Zusammensetzung wie die normale 

 Lymphe, welche die Oberfläche der intakten Gewebe und (Jrgaiie während 

 des Lebens umgibt. Physikalische Bedingungen, vor allem Oberflächeu- 

 tensionen, verursachen Lösungsverdichtungen, auch solche der Kaliumsalz- 

 lösungen auf der äußersten Oberfläche des Zellgewebes. Eine derartige 

 Verdichtung kann nur selten in den ausgezupften Geweben nachgewiesen 

 werden. Dieser Einwand kann nicht gegen solche Schnitte frischen (iewebes 

 erhoben werden, die mit dem Gefriermikrotom geschnitten und noch im 

 gefrorenen Zustande in das Kobaltreagens gebracht worden sind. Hei 

 diesem Verfahren wird die Diffusion der Lösungen vor dem Ein- 

 dringen des Reagenzes sehr beträchtlich vermindert oder iiberhaui)t voll- 

 ständig verhindert, denn das Pieagens dringt aiigeni)licklicli in alle Teile 

 der Schnitte ein. Solche Präparate, welche die X'erteilung der Kaliumsalze 

 zeigen, können nicht nur innerhalb, sondern auch außerhalb der Zellen er- 

 halten werden, und zwar in einer Weise , daß auch die örtliche lümzen- 

 tration beobachtet werden kann, die nach dem Gihhs-Thonisonsvhvn Lehr- 

 satz, d.h. auf Grund der Adsorption oder Oberflächenkondensation von 

 Lösungen, dank der Oberflächenspannung, stattfindet. 



Wie schon in der Einleitung dieser Arbeit (vgl. S. 11(10) gezeigt worden 

 ist, kann mittelst des Gefrierprozesses, nach theoretischen (iründen, eine 

 geringe Veränderung in der Verteilung der Salze in einem Zelli:efüge her- 

 vorgerufen werden: praktisch ist aber eine solche \erteilungsänderung nicht 



Abderhalden, Handbuch der biocheraiBchon Arbeitsmethoden. V. 71 



