Die Methoden tlcr biologiscliPii Mikrorliomio. 1141 



Ganz anders als den erwähnten Substanzen j-o^^enüher verliält sich 

 nun die Salpetersäure zum Caseino^^en. A. B. M(frallum') fand, daß eine 

 Salpetersäure vom spez. Gew. 1-2 (HNO3 - 320/0) Ihm :',5o C selbst nach 

 zweiwöchentlicher Einwirkunii- nicht die geringste Menge Phosphor als Phos- 

 phorsäure freimacht, und daß nach 2 Monaten nur winzig kleine Spuren 

 der letzteren nachzuweisen sind. Daraus geht also zweifellos hervor, dal) 

 zwischen der Art der Phosphorliindung in Nukleinverhindungen und andrer- 

 seits derjenigen in den Phosphorproteiden ein wesentlicher l'nterschied 

 besteht. 



Nach dem oben Gesagten ist es klar, dal» das Pieagens, das /um 

 raakrochemischen Nachweis der Phosphorsäure zu benutzen ist. .nicli unter 

 gewissen Bedingungen bei der mikrochemischen Untersuchung die Pho.s- 

 phorsäure aus den betreffenden Nukleinverhindungen frei macht und 

 demonstriert. Das Reagens, das für diesen Zweck gebraucht wird, 

 ist das Salpetersäuremolybdat von Fresenius. Es wird so dargestellt, 

 daß genau 1 Teil reiner Molybdänsäure (MqOj) in 4 Teilen starken Am- 

 moniaks (spez. Gew. 0'88) gelöst wird, und daß dann langsam lö Teile 

 Salpetersäure vom spez. Gew. 1-2 hhizugesetzt werden. Diese Lösung zeigt 

 eine hellgelbe Färbung und liefert bei eintägigem Stehen einen geiing- 

 fügigen Satz, von dem die klare Flüssigkeit abgegossen wird. Man be- 

 wahrt sie in einer mit Glasstopfen verschlossenen Flasche auf. 



Das erwähnte Reagens soll, wenn es in reichlicher Menge zu einer 

 Zwanzigstelnonnallösung eines Phosphates gefügt wiixl, sofort einen Nieiler- 

 schlag von Ammoniumphosphormolybdat erzeugen. Wenn sich dagegen der 

 Niederschlag bei Zimmertemperatur erst nach einiger Zeit bildet, ist 

 das Reagens für unsere Zwecke nicht gebrauchsfähig, denn eine \'er- 

 zögerung in der Bildung der Fällung kann Diffusion und Wiederverteilung 

 der Phosphorsäure nach sich ziehen. 



Der bei dieser Reaktion gebildete Niederschlag besteht aus Am- 

 moniumphosphormolybdat, welches, wenn das vorhandene Phosphat reich- 

 lich und frei von Proteinen vorhanden ist, in Form von oktaedrischen 

 Kristallen auftritt, das aber andrerseits, wenn eine Mi-schung von Pliosplior- 

 säure oder Phosphaten mit Eiweißlösungen vorliegt, einen mehr odei- 

 weniger amorphen Charakter, der durch die Gegenwart des Eiweißes be- 

 dingt wird, zeigt. In dem letzteren Falle kann nian nur nach mehrmaligem 

 Wiederlösen des amorphen Produktes in Ammoniak' und Fällen mit Sal- 

 petersäure die charakteristischen Kristalle erhalten. 



Die gelbe Färbung des Niederschlages genügt bereits, um seine Gegen- 

 wart in dem Reagensglas odei- in einem Schnitte zu erkennen, falls die 

 Phosphorsäure in beträchtlicher Menge vorhanden ist. Wenn sie aber in 

 Lösungen oder in einem Gewebe oder Zellelement nur in sehr geringfügigen 

 Mengen auftritt, kann die gelbe Farbe allein nicht ausreichend sein, um 

 eine deutliche Unterscheidung zwischen der Phosphorsäiirereaktion und der 



') Ä. B. Macallum, loc. cit. 



