Die Methoden der biologischen Mikrochemie. 11 -iü 



Bei Vorhandensein von (Uohulinen und Alhinninen verursacht das 

 Phenylhydrazin, in Gegenwart von Pliosphorsäiire und Phosphaten, keine 

 Keduktion des Salpetersäuremolybdatreagenzes. 



A. B. Macallum^) hat mit Lösungen von Eialbuniiu und Kiglohulin, 

 die mittelst wiederholten, mindestens achtmaligen Fidlungen dei- Lösungen 

 der Proteine des Weißes vom Ei durch Sättigen mit reinem Ammonium- 

 sulfat gewonnen worden waren, mit dem Salpetersäuremolyhdatreagens und 

 Phenylhydrazin keine Reaktion erhalten. Selbst nach einwöchentlicher Ein- 

 wirkung des Salpetersäuremolybdats bei 35" auf reines Eialbuniiu und Ei- 

 globuhn ruft das Phenylhydrazin keine Reduktion der Molybdiiusäurc hervor. 

 Es ist daher anzunehmen, daß reine Proteine die fragliche IJeaktion auf 

 Phosphorsäure nicht beeinflussen. 



Gewebe und Zellen, die in Alkohol gehärtet wurden, halten selbst 

 nach tüchtigem Auswaschen mit Wasser, leicht noch Spuren von Alkohol 

 zurück, und zwar besonders nahe der Ränder der Präparate. Infolgedessen 

 liefern die Schnitte der letzteren häufig, nachdem sie mehrere Tage lang 

 mit dem Salpetersäuremolyhdatreagens behandelt worden sind und dann 

 mit einer Phenylhydrazinlösung versetzt werden, eine blaue Reaktion längs 

 der Ränder, wo naturgemäß der Alkohol zuerst in das Gewebe eingedrungen 

 ist. Durch dieses Zurückhalten von etwas Alkohol erwächst also der Eutcr- 

 suchung des mit Alkohol gehärteten Gewebes in bezug auf die fragliche 

 Reaktion zweifellos ein Nachteil. 



Die besten Resultate, auf die man sich ohne weiteres verlassen kann, 

 werden an frischen Geweben und Zellen, und zwar in einer für das be- 

 treffende L^ntersuchungsobjekt jeweils angepaßten Weise erhalteu. Wenn es 

 sich nur darum handelt, den anorganischen Phosphor, das ist die Phos- 

 phorsäure der Phosphate, zu bestimmen, so gebraucht mau eine Methode, 

 die etwas verschieden ist von der, welche zum örtlichen Nachweis vom 

 Phosphor der Phosphorsäureester, wie in der Nukleinsäure und im Lecithin, 

 benutzt wird. 



Im ersteren Falle wird das Material möge es unizellular oder in l'orm 

 gefrorener Schnitte frischen Gewebes vorliegen, in das Salpetersäurcmolyb- 

 datreagens, dem eben vorher etwas einer 'i^/oigen PhenylhydrazinhydrochJDrid- 

 lösung zugesetzt wurde, gelegt. Es genügt, wenn man 1 rm''' der Phenylhydra- 

 zinlösung zu je 5 cm^ des Reagenzes bringt. Auf diese Weise werden die 

 Phosphate bereits nach wenigen Sekunden erkenntlich gemacht. Das Phenyl- 

 hydrazin reduziert auf einmal alle Molybdänsäure im Keagens. das sich in 

 Kontakt mit der Phosphorsäure befindet und, da das blaue Molybdänoxyd 

 unlöslich ist, so kann sein Vorkommen in einem Schnitte über die Ver- 

 teilung der Phosphorsäure ohne weiteres unterrichten. Nach \'erlauf weniger 

 Minuten, nach denen sich bereits das Maximum der lleaktion entwickelt 

 hat, werden die Schnitte in Wasser gewaschen, dann auf einen Ubjekt- 



*) über die Art und Weise, in der die wiederholte FälluiiiLr vorgeuoinraen werden 

 kann, vgl. Macallum, Proc. Roy. Soc. B. 76 (1. c). 224— 22r) (1905). 



