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soll) wird sofort eine Glykogeubestimmung nach Pfliiger angesetzt. War 

 die Vorbereitung des Tieres richtig, so läßt sich Glykogen in dem Läppchen ■ 

 nicht oder nur in Spuren nachweisen. 



In neuerer Zeit hat sich herausgestellt, daß die Milchsäurebildung bei der Durch- 

 blutung der Leber nicht nur dann ausbleibt, wenn das Organ glykogeufrei, sondern 

 auch, wenn es recht gh-kogenarm ist. Es scheint, daß im allgemeinen einfacher vier- 

 tägiger Hunger ohne Strychninisierung einen ausreichenden Grad von Glykogenarmut 

 hervorruft. Doch möchten wir dieses Verfahren vor Anstellung weiterer zahlreicher Ver- 

 suche nicht als sicher bezeichnen. 



Bekanntlich kann man durch Phlorhizinverabreichung an Hungerhunde die Leber 

 ziemlich leicht von Glykogen befreien. Es ist aber nicht zweckmäßig, sich dieses Ver- 

 fahrens zu bedienen, weil die bei der Durchströmuug der phlorhiziudiabetischen Leber 

 auftretenden erheblichen Mengen von ß-Oxybuttersäure eine exakte Milchsäurebestimmung 

 unmöglich machen. 



Bestimmung der Milchsäure in Blut und Leber. 



Blut und Leber werden in gleicher Weise verarbeitet. Die Ent- 

 eiweißung des Blutes resp. der möglichst fein zerkleinerten Leber erfolgt 

 nach Schencfc (dieses Werk, Bd. II, S. 184) mit Salzsäure und Sublimat. 

 Die gewonnenen Flüssigkeiten bleiben über Nacht im Eisschrank. Am 

 nächsten Morgen wird abgenutscht (ohne Nachwaschen). 



Die Filtrate werden mit Schwefelwasserstoff a'ou Quecksilber, dann 

 sofort durch einen kräftigen Luftstrom von Schwefelwasserstoff befreit. 

 Aliquote, gemessene Teüe werden weiter verarbeitet. Die Milch säurebe- 

 stimmungen im Blute werden stets doppelt vorgenommen, und zwar ge- 

 wöhnüch an je 1200 cm^ Blutfiltrat, entsprechend 200 cin^ Blut. Bei der 

 Leber reicht das Material für Doppelbestimmungen im allgemeinen nicht 

 aus. Die für die Einzelbestimmung abgemessene Filtratmenge wird mit 

 starker Natronlauge genau neutralisiert und dann mit verdünnter Salz- 

 säure ganz schwach angesäuert. Das ist nötig, weil sonst bei dem nun 

 folgenden Einengen die Reaktion leicht alkahsch wird, wobei der stets im 

 Filtrat vorhandene Zucker unter Bildung ätherlösücher Säuren (speziell 

 auch Milchsäure) zersetzt werden könnte. 



Die Einengung des Filtrats erfolgt im Vakuum bei einer 50" nicht 

 übersteigenden Temperatur des Heizwassers bis auf etwa 100 cm^. Die 

 eingeengte Flüssigkeit muß vöUig klar und nahezu farblos sein. (Trübung 

 ist meist dadurch bedingt, daß die Lösung alkahsch geworden ist und 

 infolgedessen die Phosphate ausgefallen sind.) Nachdem man sich nach 

 der Einengung davon überzeugt hat, daß die Flüssigkeit neutral oder ganz 

 schwach sauer reagiert (ist alkahsche Reaktion eingetreten, so wird die 

 Bestimmung verworfen), wird sie in einen Extraktionsapparat nach Lind 

 (dieses \yerk, Bd. 3, II, S. 931) übergespült, mit Ib cm^ einer kouzen- 

 trierten Phosphorsäurelösung (Gehalt an P., O5 ca. GO^/o) angesäuert, mit 

 Ammonsulfat in Substanz gesättigt und mit Äther extrahiert. 



Die Extraktion wird nach HO Stunden unterbrochen und die äthe- 

 rische Lösung im Kolben weiterverarbeitet. 



