Nachweis, Darstellung utid .nuintitative Bestimmung des Glykogens. IQI 



4 Teilen absoluter Alkohol und 1 Teil offizineller Jodtinktur mit uadifoloen- 

 der Aufhellung und Konsei-vierung- in Origauumöl. '^ 



II. Färbuno- durch einen Farbstoff. 

 a) Nach Best. Einbettung in Celloidin, Fäi-bung der Schnitte mit 

 Hamatoxvlin-Delafield, Auswaschen in Wasser, Färbun»- mit Karmin (Kar- 

 min O-o, Amnion, chlorat. l'O, Lithium cai-b. 0-2, A(iua dest. 50-0,) 1") bis 

 ao Minuten langes Einlegen in eine Lösung, enthaltend 2 Teile absoluten 

 Alkohol und 1 Teil Lniuor ammon. caust., hierauf Auswaschen in Vlkohol 

 von <0«, Entwässerung in absolutem Alkohol. Aufhellung in Xvlol und Ein- 

 bettung in Kanadabalsam. 



J') ^^'ich Lubarsrh. Härtung in absolutem Alkohol. \'orf;irbuiio' dei- 

 Schnitte mit salzsaurem alkoholischem Karmin, darauf Färbung mit' einer 

 konzentrierten Anihnwassergentianaviolettlösung, 2 — 4 Minuten' lan«- .Man 

 benutzt dazu 2 Stammlösungen, die sehr haltbar sind, und zwar Lfisuii"- I- 

 absoluter Alkohol H'&O, Anihnöl yO, Gentianaviolett im Überschuß- Lö- 

 sung IE konzentrierte wässerige Gentianaviolettlösun-'-. 

 , , ^ .y°" ^^^^'^^^ Lösungen mischt man zum Gebrauch 3 Teile von I mit 

 1( feilen von IL Kurzes Abspiden der Schnitte in Wasser, hierauf kiirzes 

 (ca. lo Sekunden) Abspülen in Grahmmcher Jodjodkaiiumlösuno- und 

 gründliches Abtrocknen der Schnitte mit Fließpapier. Entfärben mit Ani- 

 linolxylol (2 : 1) und nachträgliches gründliches Entfernen des Anilinöls 

 durch Xylol. Einbetten in Kanadabalsam. Das GIvkogen ist dunkelblau 

 bis Molett gefärbt. 



2. Chemischer (qualitativer) Nachweis. ') 



Zu demselben dient die zuerst von Claude Bernard ano-eo-ebene Jod- 

 reaktion. Je nach der Konzentration der Glvkogenlösung schwankt der 

 I arbenton von blassem Gelbbraun durch Rotbraun bis zum tiefen liot Die 

 Keaktion ist am empfindlichsten, wenn in der Lösung weder freie Säure 

 noch Alkohol vorhanden sind. 



Nach Pßüc/ers Vorschrift verfährt man am besten in der Weise daß 

 man von zwei Reagenzgläsern gleichen Kalibers eins mit Wasser ' das 

 andere mit der gleichen Menge der auf Glykogen zu untersuchenden Flüssio-- 

 keit beschickt und dann in jedes aus einer Bürette je einen Tropfen einer 

 konzentrierten Jodlösung von etwa 3% fallen läßt. Erhitzt man beide 

 ixeagenzgläser gleichzeitig, gleich stark und gleich lang, so verschwindet 

 der vorher vorhandene Farbenunterschied vollkommen, um beim Abkühlen 

 111 aer^Jodglykogenlösung wieder zurückzukehren. 



Benutzt man anstatt, wie im vorhergehenden angenommen, einer 

 Losung von chemisch reinem Glykogen die neutralen Extrakte von Oro-anen. 

 so zeigt sich, daß auch nach Zusatz der Jodlösung zu der GIvko-enlösung 

 'lie Braunfärbung bei ruhigem Stehen in der Kälte verschwindet. Die 



') rßiigcr, Das Glykogen. 2. Aufl. 1905. S. 18ff. 



Abdoihaldon, Handbuch der biochomischcn Arbeitsmethoden. II. 11 



