Nachweis, Darstellung und (quantitative Bestimmung des Glykogens. 153 



durchsichtige Filtrat wird nsich Pßügcr-Nerking behandelt, indem zu 800 ry 

 Lösung- 80.9 JK, 40 cm» Kalihmgc von 60%, 400 cm^ Alkohol von 96Vo 

 zugesetzt werden. Nachdem das Glykogen sich abgesetzt hat, wird die 

 klare Flüssigkeit abgesaugt, durch ein schwedisches Filter filtriert und das 

 Glykogen mit folgender Lösung gCAvaschen : 1000 cm^ Wasser, 100// JK, 

 50 cm'-^ Kalilauge von ßO^/o und 500 cm^ Alkohol von Dß^o- 



Das auf dem Filter befindliche Glykogen wird wieder in abgekochtem 

 heißem Wasser gelöst und abermals mit JK, KOH und Alkohol in derselben 

 Weise wie vorher gefällt und gereinigt. Dann wird das Präparat zur Beseiti- 

 gung- von JK und KOH in Wasser gelöst und mit 1 Volum 96Voi^'(^"i 

 Alkohol gefällt, abfilti'iert, mit ßG^oigPui und OfiVoip'Pni Alkohol gewaschen. 



Das so erhaltene rräjjarat wird mit einer kleinen Menge Lauge von 

 i^O^/o KOH eine Stunde lang in einem Kolben auf dem kochenden Wasser- 

 bade erhitzt. Nach Abkühlung wird die Lösung mit dem gleichen Volumen 

 Wasser versetzt und mit einem A'olumen Alkohol von 96% gefällt. Nach 

 der Filtration wird der Niederschlag gewaschen mit einer Lösung, bestehend 

 aus 1 ^'olum KOH von 15% und einem Volum xVlkohol von 96%; dann 

 2mal mit 66%igem, 96%|igem und schUeßlich absolutem iVlkohol und 

 Äther gewaschen. 



Jetzt werden 5 — 6 Fällungen mit einem oder zwei \'olumen Alkohol 

 vorgenommen, um das Präparat von KOH zu reinigen. Durch Zusatz von 

 einigen Tropfen Phenolphtalein oder von Rosolsäure wird der abtropfende 

 Alkohol auf die Abwesenheit von KOH geprüft. 



Das Glykogen wird in Wasser gelöst und der Lösung eine kleine 

 Menge Essigsäure zugesetzt, darauf ^^1rd mit 1 Volum 96%igem Alkohol 

 gefällt, die Flüssigkeit abgesaugt, filtriert und das Glykogen mit Alkohol 

 gewaschen. Diese Peinigung mit Essigsäure geschieht Ihnal. 



Zur Entfernung der Essigsäure wird das Glykogen ;> — 4mal mit 

 Alkohol gefällt, zuletzt mit säurefreiem Alkohol. Weil das Glykogen mit 

 zunehmender Reinheit immer schwieriger durch Alkohol gefällt wird, düiieu 

 die wässerigen Lösungen nicht zu verdünnt sein. Das schneeweiße Präparat 

 wird 2 Tage konstant mit al)solutem Alkohol in folgender Weise gewaschen: 

 Man verschließt das Abfhißi-ohr des Trichters mit einem Gummischlauch 

 und einer Klemme, gießt Alkohol auf das Glykogen und läßt denselben 

 nach einigen Stunden abfließen. Ebenso wird das (xlykogen mit Äther 

 o Tage lang gewaschen. Es zerfällt dann auf dem l-'iltcr in Stücke. p]s 

 wird dann über Chlorcalcium oder Phosphorsäureanhydrid (nicht über 

 Schwefelsäure) in einen Exsikkatoi" gestellt, den man evakuiert. Konstantes 

 Gewicht erzielt man durch 2tägiges Trocknen bei 100"^ C. 



Neuerdings stellt Fßiigcr reine (ilykogenlösung in folgender Weise 

 dar'): \'on dem durch Zerkleinerung in der Fleischhackmaschine gewonnenen 

 (Jrganbrei werden 500// mit 500 rms 60%iger Kalilauge ;> Stunden laug 



*) W. Grehc, Kritit^che Untcrsucliun<fen über die quantitative Analyse des Glykogens. 

 Fflilgers Archiv. Bd. 121. S. 609 (l'JÜÖ). 



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