Spaltung razemischer Monosaccharide etc. 195 



wenige oder auch 1 cui^ i>enüi'en. Durch Zusatz von 0'2Vo Tohiol hindert 

 man die Entwickhnii^' unahiietöteter Zellen oder die von Freindorj^anisnien. 

 Man inkuliei't hei ;>7"C. Da nacli ei<^-enen 15eohachtun,yen die .Spaltung' 

 nach 24 Stunden häufiiJ- nocii nicht /nni Ahschluß i^ekoninien ist. muii 

 man mindestens 48 Stunden stehen lassen. 



Darstellung- eines wässerigen Ilefeaus/uges. Zur Herstellung 

 eines wässerigen Hefeauszuges bedient man sich- frisch gewaschener Hefe, 

 die mit dem fünffachen Gewicht an Wasser etwa 24 Stunden bei 37° C 

 im Brutraum stehen gelassen und (hinn filtriert wird. 



An Stelle der durch C'hloroformzusatz oder Zerreiben mit Glaspulver 

 zu isoherenden Endoenzyme wird man sich jetzt eines nach dem Verfahren 

 von E. Buchner hergestellten Preßsaftes bedienen, den man in so geringer 

 Menge anwendet, daß er nur schwache, die Isolierung der Spaltungs- 

 produkte nicht inhibierende, (iärwirkung entfaltet. Nach eigenen Ki- 

 fahrungen kann man die Herstellung solcher Preßsäfte zur Polysaccharid- 

 spaltung auch auf Schimmelpilze übertragen, die man sich auf steriler 

 Nährlösung in der genügenden Zahl von Erlenmeyerkolben selbst züchtet. 

 Die Buchner?<(^he Methode s;n hier beschrieben. 



Anhang. 



Herstellung von Pilzpreßsäften nach Büchner.^) 



A. Hefepreßsaft. 



Die Darstellung des Hefepi-eßsaftes wurde ursprünglich zur Ein- 

 richtung der zellfreien Gärung angegeben. Dekanntlich geüngt es ohne 

 die Zertrümmerung der Zelle nicht, der Hefe die Zvmase durch Wasser- 

 extraktion zu entziehen, da dieses Enzym im ZeUsaft festgehalten wird. 

 Das Zerreißen der Zellen ist also die theoretisch wichtige Grundlage 

 der Preßsaftdarstellung ; die Trennung des Zellsaftes von den Mem- 

 branen ist mir experimentelles Beiwerk, das allerdings für das Gehngen 

 der hervorzurufenden emzymatischen Wirkungen von größter Bedeutung ist. 

 Wichtig ist vor allem , daß sich die Operation in verhältnismäßig kurzer 

 Zeit durchführen läßt, so daß die sich vermisclienden Pjizyme nicht ge- 

 nügend Zeit haben, um sich gegenseitig zu vernichten. Nor allem unter- 

 hegt bekanntlich die Zymase der Wirkung der proteolytischen Enzyme 

 des Preßsaftes. In allen Fällen muß man auch hier die Entwicklung von 

 Fremdorganismen durch einen Zusatz von 0-2Vo Tohiol hemmen, wenn man 

 den Saft im Brutzimmer zur Wirkung bringt. Größere (laben von Toluol 

 sind zu vermeiden, da sie die Enzyme zu stark hemmen. 



1) E. Buchner, H. Buchner und M. Jlahti , Die Zymasogäruiig. Untcrsucliunsjen 

 über den Tnlialt dor Tlcfozollcn und dio biologische Seite des GärungsproMems. R. Olden- 

 l)ourg, ^tliinclien und Berlin lUU;}. 



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