Darstellung der Proteine der Tierwelt: Kristallisierbare Proteine. 343 



dem Hoppe- Sei/lerschen Verfahren durch partielle Koagulation des Oxyhämo- 

 giobins schädhch wirkt, so haben Ärthus'^) und unubhäniiig' davon H. Frey"^) 

 vorgeschlagen, durch Dialyse der IJlutfarbstofflösung- gegen Alkohol den 

 Alkohol allmählich zuzuführen und dann auch nur soviel wie zur Erzeugung' 

 der Kristalle unbedingt erforderlich ist. Dabei kann man auch die niedrigen 

 Temperaturen, die beim Hoppe- Seyler^oh^n Verfahren nötig' sind, vermeiden 

 oder wenigstens einschränken. Eine genauere Vorschrift zur Darstellung 

 mittelst Dialyse findet man bei Schiiurmanns-StekJwven.^) Mit lo/giger 

 Kochsalzlösung' auf der Zentrifuge gewaschene Blutkörperchen werden 

 2 Stunden mit Asbestflocken gründlich geschüttelt. Der Blutfarbstoff löst 

 sich dann in der Salzlösung auf, indem die Stromata größtenteils an den 

 Asbestflocken ankleben und so durch Filtration entfernt werden können. 

 So kommt das (Jxyhämoglobin gar nicht mit Äther in Berührung und 

 man erhält eine sehr konzentrierte Farbstofflösung. Dann wird die Blut- 

 farbstofflösung in einem Pergamentschlauch in 45Vo Alkohol in den Eis- 

 schrank gestellt. Sobald sich Oxyhämogloliinkristalle an der Dialysatorwand 

 absetzen (nach 24 — 40 Stunden), wird der Dialysatorinhalt in ein zylin- 

 drisches (Tefäß gebracht und darin im Eisschraidv bis zum völligen Ablauf 

 der Kristallisation belassen. Zum Umkristallisieren werden die abfiltrierten 

 Kristalle bei oT" in möglichst wenig Wasser gelöst und die Lösung wieder 

 (im Eisschrank) gegen 45 Vo Alkohol dialysiert. Dieses Dialysationsverfahren, 

 das offenbare Vorteile bietet, ist bisher nur in vereinzelten Fällen praktisch 

 benutzt worden. Elementaranalysen derartiger Kristallpräparate liegen über- 

 haupt noch nicht vor. 



C. Das Ammoniumsulf atverfahren. Für manche Blutarten läßt sich 

 auch die Aussalzung mit Ammoniumsulfat zur Darstellung von Kristallpräpa- 

 raten mit Vorteil benutzen. Man kann nach diesem \'erfahren insbesondere 

 aus rferdeblut leicht große blassen Blutfarbstoff kristalle herstellen. Allerdings 

 hat dieses Verfahren den Nachteil, daß eine Umwandlung von Oxyhämoglobin 

 in ^lethämoglobin sich nicht vermeiden läßt. Für manche Untersuchungs- 

 zwecke ist das aber gleichgültig. Die ersten Versuche, Blutfarbstoff mit 

 Ammoniumsulfat kristallinisch darzustellen, hat Z^i^^WrA-^) ausgefühi't: später 

 \vAi. Schulz ■') ein Verfahren genauer beschrieben, das sich im wesentlichen 

 mit den Vorschriften deckt , die Micl-o '') später gegeben hat. Pferdeblut, 



') M. Äff lins, Verfahren. \Yelches gestattet, leicht und schnell Kristalle von Oxy- 

 hämoglobin zu erhalten. Compt. rend. soc. biol. T. 47. p. G&'ü (1895); sowie Zeitschr. f. 

 Biol. Bd. 34. S. 444-446 (1896). 



-) H. Frei/, Beiträge zur Kenntnis der Blutkristallo. Diss. Würzburg 1894. S. 228. 



^) Schuifriiiamis-Sfi'A-Jiorcii, Darstellung von kristallisiertem Oxyhiimoglobin. Onderz. 

 Physiol. Labor. Utrecht. 4. Reeks. Bd.l. S.67; ausfülirlich beschrieben in der Alihandlting 

 von Klareren. Zeitschr. f. physiol. Chem. Bd. 33. S. 296—297 (1901). 



*) P. Ditfrich, t)ber methämoglobinliildende Gifte. Arch. f. exp. Patli. u. Pluirm. 

 Bd. 29. S. 247-281 (1891). 



^) Fr. N. Schulz, Die Eiweißkörper des Hämoglobins. Zeitschr. f. physiol. Chem. 

 Bd. 24. S. 449— 481 (1898). 



^) C. Micko, mitgeteilt von K. Spiro. Zeitschr. f. plivsiol. Chem. Bd. 28. S. 182 

 (1899). 



