Darstellung der Proteine der Tierwelt: Nicht kristallisierbare Proteine. ?,5,'*, 



dürfen wir honte ruhig sagen, daß die Bestimmung der Salzfällungsgrenzen ein er- 

 freuliches Mittel zur Identifizierung der Gruppenzugehörigkeit eines Proteins bedeutet. 



Man wird also in vielen Fällen eines positiven Proteinnachweises 

 aiieh orientierende Versuche ül)er die Salzfällbarkeit der fratiiielien in 

 Lösung' befindlichen Eiweiilkörper anstellen. Als fällende Salze werden ver- 

 wendet: NaCl Mg' SO,, Na.,S04, Am.^ SO4, CH^ COOK, ZnSO,. 



Methode zur Bestimmung der Fällungsgrenzen eines in 

 Lösung befindlichen Eiweißkörpers durch Aussalzen mit Hilfe von Neutral- 

 salzen oder ^letallsalzen (obere und untere Sättigungsgrenze): 



Die Proteine werden durch gewisse Neutral- oder Metallsalze ausge- 

 salzen. Die xAbscheidung eines I'roteins aus seiner Lösung ))eginnt dann, 

 wenn die Lösung' eine für jede (Gruppe von Eiweil)kör])ern und füi- jedes 

 angewandte Salz spezifische Salzkonzentration erreicht hat (untere Fälluugs- 

 urenze). Die Abscheidung' schreitet dann mit dem Steigen des Salzgehaltes 

 bis zu einer zweiten, ebenso spezifischen Konzentration fort (obere Sätti- 

 gungsgrenze). Mit dieser Grenze ist die Abscheidung: eine quantitati^-e. 

 Weiterer Salzzusatz führt nicht zur Abscheidung-, es sei denn, dal) es sich 

 lun Lösungen von Eiweißgemischen handelt, in denen die obere Sättigungs- 

 grenze eines Körpers mit der unteren Sättigungsgrenze eines zweiten 

 Proteins zusammenfällt. L'm also diejenige Salzkonzentration zu bestimmen, 

 bei der die Abscheidung eines Proteins oder einer Proteinfraktion beginnt, 

 steigert man in gleichen abgemessenen Proben, z. 15. durch Zufuhr von 

 Ammonsulfat, den Salzgehalt der zu })rüfenden Lösung bis zum Beginn 

 einer Trübung und fährt dann mit dem Salzzusatz solange fort, bis eine 

 P^iltratprobe von dem entstandenen Niederschlag bei weiterem Salzzusatz 

 keine Fällung mehr erzeugt. Handelt es sich um Lösungen mehrerer Eiweiß- 

 körper, so fährt man mit dem Salzzusatz auch dann noch weiter fort. Zunächst 

 entstehen keine weiteren Trübungen. Von einem bestimmten Salzgehalt ab 

 tritt ^^ieder Trübung auf (untere Fällungsgrenze des zweiten Proteins). 

 Nach vollständiger Aussalzung dieses zweiten Proteins laut sich durch 

 weiteren Salzzusatz keine Trübung mehr erreichen. Damit ist die obere 

 Fällungsgrenze des zweiten Proteins erreicht bzw. überschritten. 



Ausführungi): Als Fällungsmittel dienen gesättigte, kalte, neutrale 

 Salzlösungen, z. B. neutrale, kalt gesättigte Ammonsulfatlösungen. 



Mit einer Pipette mißt man in zahlreichen Pieagenzgläsern je '2 rm-^ 

 der zu imtersuchenden Eiweißlösung oder einer Lösung des vorher i'ein 

 dargestellten Proteins al). In dieser Lösung bestimmt man voi'her den 

 Prozentgehalt an Eiweiß. Im allgemeinen prüft man die Fällungsgrenzen 

 an 5»/nigen künstlichen Eiweißlösungen. Auch die Reaktion der Lösung ist 

 zu beobachten und zu verzeichnen. 



Diese Proben versetzt man nun mit einer gleichmäßig zunelimenden, 

 in der Pipette abzumessenden Menge der Ammonsulfatlösung, indem man 



') F. P. Pick, Untersuchungen über die Proteinstoffe. IL Mitt. Zeitschr. f. physiol. 

 Chcm. Bd. 24. S. 246 (1897). — Derselbe, Zur Kenntnis der peptischen Spaltprodukte 

 der Fibrine. Ibid. Bd. 28. S. 219 (1897). (Vgl. hierzu S. 3G1, Note 2 und 3.) 



A bd tilialdon , Handbuch der biochemischen Arbeitsmethoden. II. 23 



