Darstellung der Proteine der Tierwelt: Nicht kristallisierbare Proteine. ;i55 



Das filtrierte, stark alkalisch reagierende rferdehlutplasma wird 

 (frühestens o — 4 Stunden nach der lUntentnahme) vollständii>' mit kalk- 

 freiem Kochsalz g-esättigt. Das hierbei ausfallende (ilobnlin- und Fibri- 

 nogengemisch steigt an die Oberfläche und wird abfiltrierf. Es wird als- 

 dann in wenig o"/oicC^i' Kochsalzlösung gelöst und mit dem gleichen Vo- 

 lumen gesättigter Kochsalzlösung versetzt (Halbsättigung). Der entstehende 

 Niederschlag besteht aus Rohfibrinogen. Heuhner empfiehlt bei der Halb- 

 sättigung eine strenge Kontrolle des Salzgehaltes mit Hilfe des Aräometers 

 vorzunehmen, um einen Überschuß von Kochsalz zu vermeiden. Ein zu 

 Wenig an fTdlendem Salz ist unschädlich. Der Niederschlag wird dekantiert, 

 filtriert und mit Filtrierpapier al)geprei»t, alsdann in einer 5 — SVoii^en 

 Kochsalzlösung gelöst und durch Halbsättigung mit Kochsalz erneut ge- 

 fäUt. Diese Umfällung wird o — 4mal in gleicher Weise wiederholt, so 

 daß das Filtrat der letzten Fällung nahezu eiweißfrei ist. 



Die zuletzt gewonnene Kochsalzlösung wird abfiltriert, gut mit Filter- 

 papier abgepreßt, mit Hilfe der noch anhaftenden Salzreste in wenig 

 Wasser gelöst und gegen ganz schwache Natronlauge 2 Tage bei 0" dialy- 

 siert (0-00o% Na OH). Es entstehen so etwa 0-9 Vo enthaltende Fil)i-inogen- 

 lösungen, die nahezu salzfrei sind. Die nicht dialysierten Lösungen enthalten 

 1 — 2''/o Fibrinogen nel)en 1 — 2Vo Kochsalz und Spuren Kaliumoxalat. 



Zur Hebung der Ausbeute, besonders aber bei Verwendung von ßinder- 

 blut ist es zweckmäßig (Heuhner), die jeweiligen Niederschläge der Koch- 

 salzhalbsättigung in der S^/oigen NaCl-Lösung durch Zusatz einer Spur 

 von Naa CO3 bei alkalischer Reaktion zu lösen, die erneute Kochsalzfällung 

 aber erst nach genauer Neutralisation dieser Lösungen mit Essigsäure zu 

 vollziehen. 



Um das L'nlöslichwerden von Fibrinogenanteilen zu vermeiden, darf 

 man die Niederschläge der Salzfällungen nicht unter Wasser stehen lassen. 



Aus der nahezu salzfreien Lösung kann das Fibrinogen durch Koagu- 

 lieren, d. h. Erhitzen auf 58 — 60" während mehrerer Minuten, oder durch 

 Alkoholzusatz denaturiert dargestellt werden. 



Zur äußersten Reinigung des Fibrinogens von Fibrinogiobulinbei- 

 mischungen wird die salzfreie Fibrinogenlösung mit dem doppelten 

 Volumen einer gesättigten Natriumfluoridlösung gefäht. Der Niederschlag 

 (gallertig bei Pferdefibrinogen, flockig l)ei Rinderfibrinogen) wird in Wasser, 

 das 0-057o Ammoniak enthält, gelöst. Nach Zusatz von o — 5o/o Kochsalz 

 kann diese Reinigung durch abermaliges Fällen mit Natriumfluorid wieder- 

 holt werden. Aus den NH3-, NaC'l- und NaFl-haltigen Lösungen wird das 

 Fibrinogen durch Erhitzen auf öH — 58° während 5 Minuten auskoaguliert 

 iHuiscamp'^). 



Alle auskoagulierten Fibrinogene werden mit heißem Wasser. Alkohol 

 und Äther gewaschen und schließlich bei 110'^ zur Gewichtskonstanz ge- 

 trocknet. 



M W. lltdscawp, Zur Fibrinoglobulinfrage. Zcitschr. f. phys. (bom. Bd. 44. S. 182 

 (1904). 



