Darstellimg der Proteine der Tierwelt: Nicht kristallisierbarc Proteiue. ;^^]^ 



Der entstehende flockige Niederschlag, bestehend aus Globulin und Nukleo- 

 proteid. wird nach dem Absetzen dekantiert und auf ein Filter gebracht. 

 Alsdann wird der Filterrückstand mit möglichst wenig Ammoniak in Wasser 

 gelöst. Nach dem Filtrieren dieser das Proteid enthaltenden Lösung wird 

 durch Zusatz einer Lösung von Calciumchlorid eine Fälkmg erzeugt. Der 

 entstehende Niederschlag wird auf ein Filter gebracht, mit Wasser nach 

 Zusatz von 2 Tropfen Ammoniak gelöst, filtriert und nochmals mit Calcium- 

 chlorid gefällt. Der jetzt entstehende Niederschlag wird auf dem Filter 

 mit Alkohol so lange gewaschen, bis der abfließende Waschalkohol kein 

 Calciumchlorid mehr enthält. Hierauf bringt man den Niederschlag unter 

 Äther und läßt ihn schließlich lufttrocken werden. 



Das so dargestellte Proteid enthält l-853"/o Asche, OtioO^/o Kalk und 

 nur wenig Phosphor. 



Ol) der Körper ganz rein von Globulinbeimischungen darstellbar ist, 

 bleibt zweifelhaft. Er ist wie durch CaClg auch durch BaCl.^ und MgS04 

 fällbar. Ln Überschuß des Ca Cl, ist er nicht ganz unlöslich, daher ist 

 bei der Fällung mit diesem Salz ein Überschuß zu vermeiden. 



Methode nach Liehermeister. '^) 



Je 1 / Pferdeblutserum wird mit 20 / Wasser verdünnt. In diese 

 Lösung wird Kohlensäure eingeleitet. Es entsteht eine Trübung, die sich 

 bald zu Boden setzt. Sie besteht aus Euglobulin und dem gesuchten Nukleo- 

 proteid. Man hebert die über dem Bodensatz stehende Flüssigkeit ab, 

 zentrifugiert den feuchten Niederschlag in flachen Zentrifugiergläsern scharf 

 ab. Nun setzt man zu dem am Boden des Gefäßes befindlichen Nieder- 

 schlag vorsichtig die öfache Menge einer lo/gigen Kochsalzlösung unter 

 Überschichtung zu und läßt ruhig stehen. Meist nach (> Stunden ist der 

 größte Teil des Niederschlags (das Globulin) in Lösung gegangen. Nach 

 vorsichtigem Abgießen dieser Lösung hinterbleibt ein glasiger, schleimiger 

 fadenziehender Bodensatz. Dieser wird in P/giger Kochsalzlösung nach Zusatz 

 einer ausreichenden Spur von Natriumkarbonat gelöst, und aus der Soda- 

 lösung mit wenig verdünnter Essigsäure gefällt. Nach einigem Stehen wird 

 der flockige Niederschlag al)filtriert, auf dem Filter durch Übergießen 

 mit absolutem Alkohol koaguliert und schließlich mit heißem Wasser ge- 

 waschen. Nachdem der Filterrückstand lufttrocken ist, wird er im Soxhlet- 

 apparat zur Befreiung von Fett und Cholesterin 12 Stunden lang mit 

 Alkohol und mehrere Tage mit Äther extrahiert. Die Behandlmig mit Äther 

 ist so lange fortzusetzen, bis eine Probe des Ätherextraktes keinen phosphor- 

 haltigen Bückstand mehr hinterläßt. Dann folgt eine zehnstündige Extraktion 

 mit Chloroform und Trocknen bei 100». 



Die Ausbeuten betragen etwa 2*5 (^^ aus 15/ normalem Blutserum 

 des Pferdes. In pathologischen Fällen (septische Eiterungen) kann die Aus- 



') G.Liihprmehter, Über das Nukleoproteid des Blutserums. Hofmeisters '^c'xirÄgQ. 

 Bd. 8. S. 439 (19U6). 



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