Allgemeine Technik und Isolierung der Monoamiiiosäuren. 4^] 



Abtrennung des GlykokoUs. Wie schon erwähnt, bildet es ein in ubsobitcm 

 Alkohol schwer lösliches Esterchlorhydrat. Zur Prüfung auf GlykokoU werden 

 die tief schmelzenden Kristallfraktionen verwendet. Sehr rasch läßt sich 

 die Frage entscheiden, ol) neben GlykokoU noch andere Aminosäuren vor- 

 handen sind. Es genügt, das optische ^'erllalton der Lösung zu pi-üfcn. 

 Meist findet sich neben GlykokoU noch d-Alaiiin. Zur Trennung beider 

 Aminosäuren wird entweder die ganze Kristallfraktion oder ein aliiiuoter 

 Teil derselben mit der 5fachen Menge des Gewichtes der angewandten, 

 fein gepulverten »Substanz an absolutem Alkohol übergössen. Nun wii-d in 

 die Suspension so lange trockene, gasförmige Salzsäure eingeleitet, bis Sätti- 

 gung eingetreten ist. Hat sich nicht alles gelöst, so wird auf dem Wasser- 

 bad solange gekocht, bis alles in Lösung gegangen ist. Nunmehi- wird 

 die Lösung auf Eis abgekühlt, mit einem Kriställchen von Glykokollester- 

 chlorhydrat geimpft und gut verschlossen auf Eis aufbewahrt. Von den 

 ausgeschiedenen Kristallen wird nach 12 Stunden abfiltriert. Durch Ein- 

 engen der Mutterlauge können weitere Abscheidungen bewirkt wei'den. Das 

 (ilykokollesterchlorhydrat schmilzt gegen 144". Aus der Mutterlauge der 

 letzten Abscheidung setzt man die Ester in der oben geschilderten Weise in 

 Freiheit, destilliert die Ester und verseift sie durch Kochen mit Wasser 

 und gewinnt dann durch Verdampfen der Lösung die noch vorhandenen 

 Aminosäuren. Sehr oft erhält man auf diese Weise reines d-Alanin. 



Zur Trennung von GlykokoU und Alanin ist auch das Pikrat sehr 

 geeignet.!) Man löst die zu untersuchende KristaUfraktion in wenig heißem 

 Wasser und vermischt sie mit der einfachen Gewichtsmenge Pikrinsäure 

 in alkoholischer Lösung. Beim Abkühlen kristallisiert GlykokoUpikrat vom 

 Schmelzpunkt 190" aus, während das Alaninpikrat in Lösung bleibt. 



Bei sorgfältiger Fraktionierung der x\minosäureester sind in den drei 

 erwähnten Esterfraktionen außer den genannten Aminosäuren keine anderen 

 vorhanden. Eine ganz andere Art der Verarbeitung tritt bei der 4. Esterfrak- 

 tion (Ölbad von 100—180°, Ol— 0-5 mm Druck) ein. Sie enthält die Ester 

 des Phenylalanins, der Glutaminsäure, der x\sparaginsäure und des Serins. Zu- 

 nächst wird der Phenylalauinester abgetrennt. 2) Er ist in Äther leicht htslich. 

 Die Esterfraktion wird zunächst mit dem fünffachen \'olumen Wasser ver- 

 setzt. Gewöhnlich trübt sich hierbei die Lösung, indem dei- Phcnylalaninester 

 sich in Form von feinen Tröpfchen abscheidet. Nunmehr wii'd die Lösung mit 

 dem gleichen Volumen Äther im Scheidetrichter ausgeschüttelt. Die wässe- 

 rige Lösung verhert ihre Trül)ung. Sie wird jetzt abgelassen. Die ätherische 

 Lösung enthält den Phenylalauinester und aul'ierdem noch geringe Mengen 

 der anderen Aminosäureester. Um diese zu entfernen, wird die ätherische 

 Lösung wiederholt mit Wasser gewaschen. Die gesamten wässerigen Lösungen 

 werden vereinigt und durch Kochen mit Baryt verseift. Man nimmt uiiuofähi- 



1) P.A. Let-me^GlycocollPicrate. The Journal of Biol. Cheniistry. Vol. 1. ]i. -llSl l<IÜt5). 

 "-■) Emil Fischer und Emil Ahdcrhalden, Hydrolyse des Oxyhiinu.glohiiis durch 

 Salzsäure. Zeitschr. f. physiol. Chemie. Bd. 36. S. 2G8 (19ü2). 



Abdel- baldeu, Handbuch der biochemischen Arbeitsmethoden. II. 31 



