Isolierung von Histidin, Lysin und Arginin (Ornithin und Guanidin). 501 



Die Flüssigkeit wird nun mit l^aiytwasser genau neutralisiert, gelöstes 

 Baryumnitrat zugesetzt, solange noch die Entstehung eines Niederschlags 

 zu beobachten ist, filtriert und der Niederschlag bestens ausgewaschen. Das 

 Filtrat wird durch Eindampfen auf 300 cm^ gebracht und in einem Koch- 

 koll)en nach dem Ansäuern mit Salpetersäure mit einem kleinen fber- 

 schuß. d. h. so lange mit einer konzentrierten Lösung von Silbernitrat ver- 

 setzt, bis eine Tropfenprobe in IJarytwasser einen braungelben Niederschlag 

 erzeugt. 



Ist dies erreicht, so wird mit Barvtwasser nochmals schwach sauer 

 oder e1)en neutral gemacht, aufgeschwemmtes Baryumkarbonat zugesetzt. 

 die Flüssigkeit zunächst im Wasserbade angewärmt, dann auf dem Draht- 

 netz zum einmaligen Aufkochen erhitzt und zum Absetzen und Erkalten 



beiseite gestellt. 



Der Histidinsilber haltende Niederschlag wird nun abfiltriert und 

 kalt mit schwach barythaltigem Wasser (5 — 6 Tropfen einer öo/oigen Ätz- 

 barytlösung auf 100 ciii^ Wasser) bis zum Verschwinden der Salpeter- 

 säurereaktion sorgfältig ausgewaschen. Filtrat und Waschwasser werden 

 vereinigt und zur Argininbestimmung reserviert. 



Der argininfreie Niederschlag wird im Kolben mit schwefelsäure- 

 haltigem Wasser zur sauren Reaktion erhitzt, mit Schwefelwasserstoff zer- 

 setzt, die Flüssigkeit zur Entfernung des Schwefelwasserstoffs gekocht, das 

 Schwefelsilber abfiltriert, wiederholt ausgekocht und mit siedendem Wasser 

 bis zum Verschwinden der Phosphorwolframsäurereaktion völlig erschöpft. 

 Filtrat und Waschwasser werden vereinigt und durch Eindampfen auf 

 2b0 ciit'^ gebracht; alsdann wird in 25 — 50 oii^ der Stickstoff nach Kjeldahl 

 bestimmt. Aus dem durch diese Bestimmung gefundenen N-Wert wird das 

 Histidin berechnet. 



Der Best der Flüssigkeit wird mittelst Ätzbaryt heiß von der über- 

 schüssigen Schwefelsäure, durch Kohlensäure vom überschüssigen r)aryt 

 befreit, eingedampft und vom ausgeschiedenen Baryumkarlionat und -sulfat 

 abfiltriert. Filtrat und Waschwasser des wiederholt heiß gewaschenen 

 Niederschlages werden vereinigt, nochmals eingedampft, nötigenfalls durch 

 wenige Tropfen verdünnter Schwefelsäure von den letzten Spuren Baryt 

 befreit und auf etwa 10 cin^ gebracht. 



Diese Flüssigkeit dient zur genaueren Bestimmung des Histidins in 

 Form des gut kristallisierenden und schwerlöslichen Salzes mit Tikrolon- 

 säure, die von Steudel in die physiologische Chemie eingefiüirt worden ist. 

 Nach Maßgabe der vorher ausgeführten Kjeldahll)estimmung kaim man 

 die Menge der zur AusfäUung erforderlichen Pikrolonsäure berechnen. 

 Man fügt einen geringen Überschuß der in wenig heißem Alkohol gelösten 

 Pikrolonsäure hinzu, saugt das entstandene Pikrolonat nach ;> Tagen ab, 

 wäscht es mit wenig Wasser aus, trocknet bei 100» und bringt es zur 

 Wägung. Das Histidin ist nach der Formel C,o HsNiüg . CeHgNa 0., aus 

 dem Pikrolonat zu berechnen. 



