Isolierung von Peptonen. 55^7 



gerülirt bzw. umgeschüttelt. Täglich werden 10 — 15 cm^ Toluol und 5 bis 

 10 cm^ Chloroform zugegeben. Nach Htägiger Verdauung werden noch H g 

 Trypsin zugegeben. Im ganzen wird etwa 9 Tage verdaut. 



B. Isolierung des Peptons. 



In die Verdauungslösung werden Ib kg Ammonsulfat eingerührt; es 

 wird ca. 15 Stunden bei Körpertemperatur bis zur Auflösung des Ammonsul- 

 fates und zum Zusammenballen der Albumosen weiter gerührt. Nach Erkalten 

 wird von ausgeschiedenen All)umosen abgeseiht, der Albumosenniederschlag 

 abgepreßt. Das durch Filtrieren durch Papier klar erhaltene Filtrat wird 

 nach Beispiel I von All)umosen befreit und weiter verarbeitet. Aus dem 

 nach Beispiel I umgefällten Eisenniederschlage I erhält man das Trvpsin- 

 fibrinpepton ß. Zur Ausfällung des Eisenniederschlages I sind 200 g Ferri- 

 ammonsulfat verbraucht worden. 



Die Zwischenfällung. 



Um die letzten Pieste des Trypsinfibrinpeptons ß zu entfernen, wird 

 das Filtrat vom Eisenniederschlage I mit ammonsulfatgesättigtem Ammoniak 

 neutraUsiert und in dasselbe 20 (/ Ferriammonsulfat eingerührt. Hierauf 

 wird mit ammonsulfatgesättigtem Ammoniak neutraUsiert und von dem 



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Eisenniederschlage, der verworfen wird, filtriert. 



Der Eisenniedei'schlag II. 



In das Filtrat der Zwischenfällung wird solange abwechselnd feinge- 

 pulvertes Ferriammonsulfat verrührt und ammonsulfatgesättigtes Ammoniak 

 zugefügt, bis eine Probe des Filtrates nur noch eine schwache Biuret- 

 reaktion gibt. Es werden ca. 1100 .9' Ferriammonsulfat gebraucht. Der 

 Niederschlag wird auf glattem Filter filtriert, dann abgenutscht, 4uud mit 

 gesättigter Ammonsulfatlösung gedeckt, mit ca. o l gesättigter xVmmon- 

 sulfatlösung verrieben. Durch Zusatz einer Mischung von 330 cm^ gesättigter 

 Ammonsulfatlösung und 170 cm^ konzentrierter Schwefelsäure unter Um- 

 rühren wird der Niederschlag gelöst und durch Neutralisation mit ammon- 

 sulfatgesättigtem Ammoniak unter kräftigem Motorrühren der Niederschlag 

 gefällt. Der Niederschlag wird filtriert, geuutscht, 4mal mit gesättigter 

 Ammonsulfatlösung gedeckt, von der Nutsche hei-untergenommen, mit 

 Ammonsulfatlösung verrieben, wieder al)gesaugt, 3nial mit gesättigter 

 Ammonsulfatlösung gedeckt. Der scharf abgesaugte Niederschlag wird mit 

 ca. 2 l Wasser verrieben, unter Rühren durch allmählichen Zusatz von 

 ca. 800 cm 3 20''/oiger Schwefelsäure gelöst. In die Flüssigkeit wird bei 

 18 bis 20" solange feingepulvertes Barythydrat eingetragen. i)is ein geringer 

 Überschuß desselben vorhanden ist. Zuletzt wird auf 40° erwärmt. Der 

 Niederschlag wird abgesaugt, mit Wasser ausgewaschen, von der Nutsche 

 heruntergenommen, verrührt, wieder abgenutscht und mit Wasser ausge- 

 waschen. Das mit den Waschwässern vereinigte Filtrat wird mit Ammon- 

 karbonatlösung von der geringen Menge überschüssigen Barytes befreit. 



