Methoden zur biologischen Spaltung razemischer Aminosäuren etc. öß;>, 



folgenden Tagen je V4— V2 Stunde lang zum Sieden erliit/t. Die abge- 

 kühlten Lösungen werden dann wie üblich mittelst eines ausgeglühten 

 Platindrahts mit der Kcinkultur des betreffenden Pilzes geimpft und schliei;- 

 lich bei Zimmertemperatur oder im Brutschrank bei dem Temperatur- 

 optimum des angewandten Mikroorganismus sich selbst überlassen. 



Die Entwicklung des Pilzes beginnt bereits nach einigen Tagen. P^s 

 zeigen sich dann gewöhnlich weißliche Flecke auf der Oberfläche der Flüssig- 

 keit, die sich nach und nach vollständig mit einer sporentragenden Pilz- 

 decke überzieht. Ein Teil des Pilzmycels entwickelt sich untergetaucht in 

 der Lösung am P)oden des Gefäßes. I^ei Anwendung von Hefe ti'iibt sich 

 der Kolbeninhalt allmählich unter Aufsteigen von (iasblasen. 



Die Versuche können als beendet gelten, wenn die Pilzdecke kein 

 merkliches Wachstum mehr zeigt und eine Gasentwicklung in der Flüssig- 

 keit nicht mehr zu beobachten ist. Die Dauer der Pilzspaltung ist eine sehr 

 verschiedene und von vielen Zufälligkeiten abhängig. Sie kann 4 bis 12 

 Wochen im ganzen betragen. Doch ist auch häufig nach dieser Zeit die 

 Aminosäure nicht optisch rein, sondern noch mit dem Pvazemköi-per ge- 

 mischt wieder zu gewinnen und muß dann, wenn dies erforderlich, noch 

 ein zweites Mal nach Zugabe von neuer Nährlösung und wiederholter 

 Sterilisierung mit dem betreffenden Pilz angesetzt werden. 



Zur Isolierung der unangegriffenen optisch aktiven Aminosäure wird 

 das Pilzmycel durch Filtration entfernt und die farblose bis gelblich gefärl)te 

 Flüssigkeit auf dem Wasserbad zur Trockne verdampft. Aus dem Rück- 

 stand extrahiert man die Aminosäure durch Kochen mit Alkohol, dem 

 etwas konzentrierte Ammoniakflüssigkeit zugesetzt ist. Oder man fällt aus 

 der ursprünglichen filtrierten Lösung die Schwefelsäure und Phosphorsäure 

 mit Barvtwasser, kocht das Filtrat mit frisch gefälltem Kupferoxyd und 

 scheidet durch Eindampfen die Aminosäure in Form ihres Kupfersalzes 

 ab, das in üblicher Weise weiter verarbeitet wird. 



Beispiel: Die Lösung von og dl-Leucin in bOO cm^ Wasser wird 

 nach Zusatz von 10 cw^ der erwähnten Nährsalzflüssigkeit in iMilaskolben 

 verteilt, sterilisiert und mit Penicillium glaucum geimpft. Nach 6 Wochen 

 wird die Lösung filtriert, eingedampft und der Rückstand mit wässerigem 

 Ammoniak enthaltendem Alkohol ausgekocht, so daß die Salze ungelöst 

 zurückbleiben. Die aus dem Extrakt beim Verdunsten erhaltene rohe Amino- 

 säure liefert umkristaUisiert 0-9 r/ reines d-Leucin. 



II. Spaltung durch Hefegärung. M 



Für diese Methode der Aminosäurenspaltung dient ausschliel'dich 

 gut ausgewaschene und abgepreßte, möghchst eiweißarme obergärige 



') Felix Ehrlich, t)l)er eine Methode zur Spaltung razemischer Aminosiiuren 

 mittelst Hefe. I. Biochem. Zeitschr. Bd. 1. S. 8 (1906); II. Biochem. Zeitschr. Bd. H. 

 S. 438 (1908). — Derselbe, LHjcr das natürliche Isomere des Lcucins. II. Bor. d. 

 Deutsch, ehem. Ges. Bd. 40. S. 2538 (1907). — Felix Ehrlich und A,lnlf Wnidcl, Zur 

 Kenntnis der Leucinfraktion des Eiweißes. Biochem. Zeitsclir. Bd. 8. S. 399 (1908). 



36* 



