Nukleinsäuren und deren Abbauprodukte : Isolierung der Abbauprodukte. 589 



Bemerkungen. 



Zu der Verarbeitung der Fraktion der Alloxurbasen wäre noch 

 folgendes zu bemerken : 



A'on Krüger'^) ist seinerzeit enipfohk'u worden, statt des Silber- 

 verfabrens die Alloxurbasen mit Kupfersulfat und Natriumbisulfit nieder- 

 zuschlagen; diese Methode ist häufig angewandt worden und wird jetzt 

 noch vielfach benutzt. Handelt es sich aber um UntersuchungiMi. in denen 

 auch die etwaigen Filtrate noch verarl^eitet werden sollen, so ist die 

 Methode schon an und für sich nicht anwendbar: nach meinen F.rfahiimgen 

 ist sie aber auch sonst äußerst schwierig, da sich das Ende der Fällung 

 nur sehr schwer beurteilen und der Zusatz der einzelnen Reagenzien sich 

 nur bei sehr großer Erfahrung einigermaßen dosieren läßt, ^'or dieser 

 Kupfersulfatbisulfitmethode kann daher nur gewarnt werden. Freilich ist 

 auch das Sillierverfahren zm' Ausfällung der Alloxurbasen nicht vollkommen, 

 die Fällung ist vor allem nicht absolut quantitativ und die schwierige 

 und langwierige Trennung der einander so ähnlichen Nukleinbasen erfordert 

 große Geduld und Geschicklichkeit. Man hat die quantitative Genauigkeit 

 der Methode sicher weit überschätzt: die in ihren Fällungsverhältnissen fast 

 oleichen Basen Guanin und Adenin lassen sich absolut rein nur mit relativ 

 großen Verlusten voneinander trennen. Man benutzt zu ihrer Scheidung 

 allgemein die verschiedene Löslichkeit der beiden Substanzen in Ammoniak 

 und wiederholt diese Fraktionierung meist zweimal, aber einerseits ist das 

 Guanin nicht absolut unlöslich in Ammoniak — nach Wulff '^) lösen: 



100 cm^ Ammoniak von P/o O'OOOr/ Guanin 

 100 „ „ „ 30/0 0-015 „ „ 



100 „ „ , 50/0 0-019.. „ 



und auf der anderen Seite fällt bei längerem Stehen in ammoniakalischer 

 Lösung ein großer Teil des Adenins aus, das eigenthch gelöst bleiben 

 sollte. 3) Auch die Trennung von Xanthin und Hypoxanthin ist keineswegs 

 schon bei der ersten Fraktionierung vollkommen und ei'fordert ein mehr- 

 maliges Wiederholen derselben (Operation, wobei natürlich jedesmal ein 

 beträchtlicher Teil verloren geht. Sobald man nur kleine Mengen aufzu- 

 teilen hat, ist eine exakte (luantitative Bestimmung überhaupt unmöglich, 

 ebenso wie das Vorherrschen einer einzigen Xukleinbase in dem Gemenge 

 zu einer jedesmal sinngemäßen Abänderung des Verfahrens zwingen würde. 



M. Krüger, Über die Fällbarkeit der Harnsäure und der Basen der Harnsäure- 

 gruppe als Kupferoxydulverbiudungen. Zeitschr. f. physiol. Chem. Bd. IH. S. 351 (1M93). 

 — Derselbe, Das Verhalten von Harnsäure, Adenin und Hypoxanthin zu Kupfersulfat 

 und Natriumsulfit, respektive Natriumthiosulfat. Zeitsclir. f. physiol. (hein. Bd. 20. 

 S. 170 (1894). 



"') C. Wulf, Beiträge zur Kenntnis der Nukleinsäure. Zeitschr. f. physiol. Chem. 

 Bd. 17. S. 505 (1892). 



') A. Kossei, V/eitere Beiträge zur Chemie des Zellkernes. Zeitschr. f. pliysiol. 

 Chem. Bd. 20. S. 251 (1886). 



