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2. Reaktion von Hammarsten.^) Man verwendet ein zum min- 

 desten für 1 Jahr dauerhaftes Gemisch von 1 \o\\\m 25''/oiger Salpeter- 

 säure und 19 \'oluniina 25''/oig-er Salzsäure, das durch Stehen gelblich ge- 

 worden ist. Kurz vor Ausführung- der Probe mischt man 1 Volum der 

 Säurelösung mit 4 Volumina Alkohol. Zu einigen Kubikzentimetern dieser 

 Säurelösung läßt man die auf Bilirubin zu prüfende Lösung tropfenweise hin- 

 zu. Im Fall der Bilirubinanwesenheit entsteht nach wenigen Tropfen eine 

 dauerhafte Grünfärlmng. Durch steigenden Zusatz des Säurereagens kann 

 man schrittweise sämtUche Farben der (rmeZiwschen Farbenskala hervor- 

 rufen. 



Die Probe ist für Bilirubin typisch, bedarf aber einer bestimmten 

 Minimalkonzentration des Bilirubins. Bei Verwendung von Harn fällt man 

 daher den Farbstoff erst in der oben beschrielienen Weise als Kalksalz 

 und löst den Kalkniederschlag direkt in dem Reagens. 



3. Reaktion von Huppert-) auf Bihrubin. Man fällt das in Lö- 

 sung befindliche Bilirubinalkali durch Kalkmilch bzw. Chlorcalcium + Am- 

 moniak oder aus schwach saurer Lösung (Harn) durch das gleiche Vo- 

 lumen einer lO^/oigen Chlorbarvumlösung. Den entstehenden Niederschlag 

 sammelt man auf einem Barytfilter oder durch Zentrifugieren. Der Doch 

 feuchte, von der Flüssigkeit getrennte, eventuell mit Wasser gewaschene 

 Niederschlag wird mit schwach salzsaurem xVlkohol längere Zeit zum Sieden 

 erhitzt. Bilirubinanwesenheit ruft eine smaragdgrüne bis blaugrüne Fär- 

 bung hervor. 



Modifikation von Nakayama.^) Man fügt zu dem genannten 

 Kalk- oder Barytniederschlag eine Probe einer Lösung von 99 Teilen 

 95'Voig<?m Alkohol + 1 Teil roher rauchender Salzsäure + 4 // Eisenchlorid 

 pro 1 l der Alkohol-Säuremischung. Nach dem Sieden wird die Lösung 

 grün bis blaugrün, nach vorsichtigem Zusatz rauchender Salpetersäure zu 

 der i)laugrünen Lösung geht die blaue Farbe in Molett oder Rot über. 

 Die Probe ist außerordentlich empfindlich (1:1,000.000). 



4. Reaktion von Ehrlich.^) Man extrahiert das Bilirubin der ge- 

 färbten Lösung oder den künstlich erzeugten Kalkniederschlägen mit Chloro- 

 form. Zu 1 Teil dieser Lösung setzt man 2 Teile einer f/ooigen Diazo- 

 benzolsulfosäurelösung (durch Auflösen von 1 g p-Anilinsulfosäure in 1 l 

 Wasser, Ih cm^ konzentrierter Salzsäure und Ol r/ Natriumnitrit) und fügt 



^) 0. Hammarsicn , Eine neue Reaktion auf Gallenfarbstoffe, insbesondere im 

 Harn. Mah/s Jahresb. 1898. S. 310. Upsala Läkareför. Förhandl. (X.F.). p. 4. 



2) H.Huppert, Archiv für Heilkunde. Bd. 8. S. 351 u. 467 (1867); vgl. I.Munk, 

 Über den Nachweis des Gallenfarbstoffes im Harn. Arch. f. Anat. u. Phys. (Phys. Abt.) 

 S. 361 (1898). 



■'J J/. Xal-aijama, t'ber eine Modifikation der Hi(ppert?.ch^\\ Gallenfarbstoffreaktion. 



Zeitschr. f. physiol. Chemie. Bd. 36. S. 398 (1902). 



*)P. Ehrlich, Sulfodiazobenzol, ein Reagens auf Bilirubin. Zentralbl. f. klm. 

 Med. Bd. 4. S. 721 (1883); vgl. hierzu Wiener klm. Wochenschr. Bd. 8. S. 173 (1898). 



