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verwendet man jeweils zur Extraktion neuer Harnportionen, indem mau 

 Verluste durch neuen Zusatz ergänzt. Durch Schütteln mit wenig Wasser 

 entzieht man dem Essigäther etwa bereits vorhandenes Urobihn. Im Falle 

 seiner Anwesenheit färbt sich das Wasser braun. Den Nachweis des Uro- 

 bilinogens erbringt man nun, indem man die Essigätherlösung der Licht- 

 wirkung aussetzt und das sich bildende Urobilin wiederum mit ange- 

 säuertem Wasser extrahiert und nach einer der folgenden Methoden quali- 

 tativ identifiziert. 



Qualitativer Nachweis und Identifikation des Urobilins. 



Von den äußeren Eigenschaften des Urobilins ist die Fluoreszenz- 

 erscheinung seiner alkalischen Lösung und das charakteristische Spektral- 

 bild der Absorptionsstreifen verwertl)ar. Letzteres ahein gestattet die Identi- 

 fikation des isoUerten Farbstoffes. 



I. Im Harn: 



1. Man versetzt den Harn mit einigen Tropfen Schwefelsäure und 

 prüft spektroskopisch (s. u.): stark dunkelgefärbte Harne verhindern bis- 

 weilen die spektroskopische Analyse. In diesem Falle beseitigt man die 

 Farbstoffe (Gallenfarbstoffe) durch Zusatz von dem halben Volumen an 

 Deniges' Reagenz {p g HgO in 20 cm'^ Schwefelsäure + 100 cm'^ Wasser) 

 und prüft das Filtrat der entstehenden Fällung. 



2. Man versetzt den Harn mit Ammoniak, filtriert und setzt etwas 

 (10% ) C'hlorzinklösung zu. Das Auftreten einer rotgrünen Fluoreszenz zeigt 

 Urobilin an. Die Prolie wird durch spektroskopische Prüfung der fluores- ' 

 zierenden Lösung kontrolliert. \ 



Man kann auch nach Schlesinger'^) derart verfahren, daß man zu ( 

 dem Harn das gleiche Volumen einer 10'' oigen, absolut alkoholischen Zink- ' 

 acetatlösuug zufügt und dann filtriert. Die leichteste Fluoreszenz läßt sich 

 mit einer Konvexlinse beobachten. 



r>. Sind die Flame dunkel gefärbt oder urobilinarm, so extrahiert; 

 man das Urobilin, indem man etwa 50 cm^ Harn mit einigen Tropfen Salz- 1 

 säure ansäuert und mit 25 cm^ Amylalkohol unter geUndem Durchmengen j 

 extrahiert.-) Die beiden Lösungen schickt man durch ein kleines Fiher 

 und prüft dann die abgetrennte amylalkoholische Schicht spektroskopisch! 

 und auf Fluoreszenz nach Zusatz einer alkoholischen Chlorzink- oder Zink- ! 

 acetatammoniaklösung. lg Chlorzink in 100g ammoniakhaltigem Alkohol.! 



Die Methoden der Extraktion sind mannigfaltig modifiziert worden : \ 



Nach JRoman und Deluc^): Man säuert 100 cm^ Harn mit 8 bis| 

 10 Tropfen Salzsäure an und schüttelt vorsichtig mit 20 cni^ Chloroform aus.; 

 Von der durch ein Asbestfilter geschickten Chloroformlösung werden 2 cm^l 



*) IV. Sclilesinger, Zum klinischen Urobilinnachweis. Deutsche med. AVochenschr. 

 S. 561 (1903). 



^) M. Nenchi und Ä. Eotscluj, Zur Kenntnis des Hämatoporphyrins und des Bili- 

 rubins. Monatsb. f. Chemie. Bd. 10. S. 568 (1889). 



''^) Th.BoDia» und G.Dchic, Nachweis von Urobilin im Harn. Jouru.de Pharm 

 et Chim. (6. Serie). Vol. 12. p. 49 (1900); ibidem Vol. 19. S. 425. 



