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material (25 — tiO crn^ Harn hei Indikanreichtum , oOO cm^ normalen 

 Harn). Die 300 cm^ Harn werden dann portionenweise mit 25 bis 

 bO cm^ einer 20o/oigen Bleiaeetatlösung versetzt und filtriert, 250 cm» 

 des Filtrates werden in einem Scheidetrichter mit 250 crn^ von Oberinai/ers 

 Reagens (konzentrierter HCl mit 2 . p. m. Eisenchlorid) und 30 cm^ Chloro- 

 form versetzt und je^veils 1 Minute geschüttelt. Hierauf läßt man die 

 Chloroformschicht vorsichtig ab und wiederholt die Ausschüttelungen mit 

 neu zugefügten Chloroformmengen, bis die Chloroformextrakte farblos 

 bleiben. Im allgemeinen genügen drei Ausschüttelungen. Die in einem 

 Kölbchen gesammelten Chloroformextrakte werden zur Reinigung und Be- 

 freiung von salzsauren und organischen Verunreinigungen (Urobilin, Kre- 

 sole, Phenole, aromatische Säuren, Oxysäuren) 2 — 3mal mit reinem Wasser 

 und dann mit Natronlauge (1 : 1000) geschüttelt (Maillard'^), Gnezda). 

 Durch Waschen mit Wasser werden die letzten Spuren Alkali entfernt. 

 Hierauf wii'd die Chloroformlösung durch etwas Asbest filtriert. Das 

 Filtrat wird durch Destillation von Chloroform befreit, der Rückstand 

 kurze Zeit auf dem Wasserbad getrocknet und dann noch warm mitlOcm^ 

 konzentrierter Schwefelsäure versetzt. Nachdem sich durch vorsichtiges 

 Schütteln und Erwärmen auf dem Wasserbad während 10 Minuten alles 

 gelöst hat, verdünnt man vorsichtig mit einer größeren Wassermenge. 

 Geht nicht der gesamte Chloroformrückstand in Lösung, so filtriert man 

 die verdünnte Lösung quantitativ von braunen Flocken ab und wäscht das 

 Filter gut mit heißem Wasser aus. Nunmehr titriert man die schön blaue 

 durchsichtige Lösung mit einer Kaliumpermanganatlösung , die auf eine 

 Oxalsäurelösung von bekanntem Gehalt eingestellt ist. Man verwendet am 

 besten ein Gemisch von 5 cm^ einer 3 p. m. KMnOi-Lösung -f 195 crn^ 

 Wasser, deren Titer vorher bestimmt ist. Die Titrierung ist beendet, wenn 

 eine grünliche Färbung verschwunden oder Gelbfärbung bzw. Farblosigkeit 

 eingetreten ist. 



Durch Multiplikation des Oxalsäurewertes der Titerlösung mit 1"04: 

 ergibt sich die gefundene Indigomenge. 



Beispiel : 



1 cm^ KMnOi-Lösung (etwa 3 p. m.) = 0-00596 r/ Oxalsäure 



1 „ „ = 0-0062 ,, Indigo 



1 „ der verdünnten KMnOi-Lösung (5 : 195) = 0-00015^ „ 



Es seien verbraucht •4-3 cm^ K Mn 04-Lösung = 0-00065 ,. „ von 

 dem ursprünglichen Flüssigkeitsvolumen (300 Harn + 25 cm^ Bleizucker- 

 lösung) wurden verwendet 250 cm^. 



Also : 250 : 0-00065 = 325 : x. 



x = 1-3 . 0-00065 = 0-000845.(7 Indigo in 300 cm^ Harn. 



^) L. C. Maülard, Über die Entstehung der Indoxylfarbstoffe und die Bedeutung 

 des Harnindüxyls. Zeitschr. f. physiol. Chem. Bd. 41. S. 437 (19U4). — E. Salkotrski, In- 

 dikanbestimmung. Ibid. Bd. 42. S. 213 (1904). 



