Tierische Pigmente und Farbstoffe. 75]^ 



Methode nach Bouma^) Sie beruht im Prinzip darauf, dal) sich 

 das durch Säurespaltung' in Freiheit gesetzte Indoxyl mit Isatinsalzsäure 

 zu dem einheitlichen Indigorot umsetzt, das nachher mit einer auf reines 

 Indigrot eingestellten Kaliumpermanganatlösung titrieil wird. 



Auch hier überzeugt man sich durch kolorimetrische Norproben von 

 dem bestehenden Indoxyh'eichtum , indem man gleiche Mengen Harn und 

 Isatinsalzsäurereagens (20 mg Isatinum Merck purissimum in 1000 cm^ 

 chemisch reinster, eisenfreier konzentrierter Salzsäure) kocht und mit et- 

 was Chloroform ausschüttelt. Indikanreichtum veranlaßt eine dunkelwein- 

 rote, Indikanarmut eine helle rosarote Färbung des Chloroforms. Im er- 

 steren Falle verarbeitet man 25 — 50 cm'^. im letzteren Falle ;»00 cm'^ Harn. 

 Diese 300 cw^^ ^verden mit 30 cm^ basischem Pjleiacetat gefällt: von dem 

 klaren Filtrat werden 275 cm^ (= 250 em^ Harn) abgemessen und ' ^ Stunde 

 lang mit dem gleichen Volumen der Isatinsaksäurelösung auf dem AVasser- 

 bad erhitzt. Die abgekühlte Flüssigkeit wird dann in der oben l)eschrie- 

 benen Weise (Methode von Wang) mit 3mal 30 cm^ Chloroform erschöpft. 

 Nach dem Absetzen gieüt man die Chloroformlösung vorsichtig in ein 

 Kölbchen, destiUiert die Hauptmasse Chloroform am Wasserbad ab und 

 trocknet 2 Stunden bei HO''. Aus dem lUickstand entfernt man das über- 

 schüssige Isatin und die Salzsäure durch mehrfaches Waschen mit heiiJem 

 Wasser. Das Residuum trocknet man abermals, löst wie bei Wang (siehe 

 oben) in Schwefelsäure, verdünnt und titriert mit Perraanganatlösung. 



Die Indigolösung sowie die Titrierflüssigkeiten müssen vollkommen 

 klar sein. Die Verdünnung der Indigrotf lüssigkeit soll die Verdünnung von 

 1 g Indigrotdisulfonsäure auf 20000 ««^ Wasser nicht überschreiten. Erfolgt 

 beim Titrieren eine Braunfärbung durch Abscheidung allerfeinsten Mangan- 

 dioxyds, so ist der Säuregrad mit starker Schwefelsäure zu erhöhen. 



Die Berechnung der gefundenen Indigomenge erfolgt in der Weise, 

 daß man die Permanganatlösung vorher auf eine Lösung von reinem In- 

 digorot einstellt. Diese Lösung bereitet man sich derart, daß man 

 käufliches Indigorot in Chloroform löst, aus dem Verdampfungsrückstand 

 das reine Indigrot in Äther aufnimmt, und den getrockneten Ätherrück- 

 stand (= gereinigtes Indigrot) in einer Menge von 5 oder 10 mg genau 

 abwägt und in konzentrierter Schwefelsäure löst. Hierzu fügt man zu iie- 

 liebiger Verdünnung Wasser und bestimmt durch Titration mit einer Per- 

 manganatlösung (siehe bei Wang) diejenige Menge Permanganat, welche 

 1 mg Indigrot entspricht. Bei der Umrechnung der im Hauptversuch der 

 Indoxylbestimmung ver])rauchten Permanganatmenge (ausgedrückt in Kubik- 

 zentimeter der verbrauchten, vorher eingestellten Lösung) ist die Hälfte 

 von dem gefundenen Wert für die Menge präformierten Indoxyls in Rech- 

 nung zu setzen, da ja die Hälfte des Indigrotmoleküls von dem im \er- 

 such zugeführten Isatin geliefert worden ist. 



1) J.Bouma, Über Bestimmung- des Harnimlikans. Zeitschr. f.physiol.rhcm. Hd. 32. 

 S. 82 (1901). — Nachtrag zur Methode der Indikaubestimmung im Harn. Zeitschr. f. 

 physiol. Chem. Bd. 39. S. 356 (1903). 



