Nachweis und Bestimmung von Giften auf liiologischem Wege. {~^ 



Hin- und Herbewegen mit etwa bOcm^ sterilem destillierten Wasser ober- 

 flächlich abgespült. Darauf kommen sie in eine zweite Schale mit 50 cm^ 

 Waschwasser, worin sie 5 Minuten verweilen. Schliclilich werden sie ein- 

 zeln mit steriler Pinzette in eine dritte Schale, die ebenfalls 50 f'y/<3 steriles 

 Wasser enthält, eingelegt; hier bleiben sie nochmals 10 Minuten. Damit ist 

 der Waschprozeß , der ungefähr 15 Minuten dauert, beendet. In der ersten 

 Schale wird schon die Hauptmenge des Desinfiziens entfernt. Hier lälit 

 man die Granaten aber nur ganz kurz, um eine Nachwirkung der wenn 

 auch schon stark verdünnten Substanzen nicht aufkommen zu lassen. Die 

 letzten Reste werden durch die zweite und dritte Waschung entfernt, 

 wobei Sorge zu tragen ist, daß die Granaten in den Schalen möglichst 

 isoliert hegen und daß sie ferner stets von frischem Wasser umspült 

 werden, was durch vorsichtiges Bewegen der Schalen leicht zu erreichen ist. 



Nachdem die Granaten so behandelt, werden sie mit steriler Pinzette 

 zu je 5 Stück in Reagenzröhrchen übertragen, die Pycni^ steriles Wasser 

 enthalten. Die so mit Granaten beschickten Röhrchen werden serien- 

 weise, zu je 6—9 Stück, in der Hand kräftig geschüttelt, um die an- 

 haftenden Keime abzulösen und in das Schüttelwasser überzuführen. L)abei 

 ist darauf zu achten, daß nicht etwa Wassertröpfchen an den Watte- 

 pfropf gelangen , wodurch viele Keime der Untersuchung entzogen werden 

 könnten. Die in dem Wasser suspendierten Keime können nunmehr auf 

 das Nährsubstrat übertragen werden, um die noch lebensfähigen Individuen 

 zur Entwicklung zu bringen. Um aber den Vorgang der Abtötung von 

 Bakterien durch ein Desinfiziens quantitativ verfolgen zu können, müssen 

 die noch vermehrungsfähigen Keime gezählt werden, was nur mit Hilfe 

 fester Nährböden möglich ist. Hierbei kommt in erster Linie Nähragar in 

 Betracht, da nach Einwirkung der Desinfektionsmittel die Mikroorganismen 

 bei optimalen Temperaturen, also meist bei oT"^, gehalten werden sollen. Zu 

 empfehlen ist ein 2°/oiger Agarnährboden, aus bestem Rindfleisch hergestellt. 

 \'on dem verflüssigten und auf 42** abgekühlten Agar werden l'2c)n^ in 

 die Röhrchen gegeben, welche die von den Granaten abgeschüttelten Keime 

 enthalten. Dabei müssen die Röhrchen während des Zugießens des Agars 

 ständig um ihre Längsachse gedreht werden, damit von dem herabfließenden 

 Nährboden die Innenwände vollständig bespült und alle keimhaltigen 

 Wassertröpfchen aufgenommen werden. Mit einer Platinspirale wird dann 

 der xA.gar und das Schüttelwasser mit den abgelösten Keimen vermischt 

 und in Petrischalen ausgegossen. Es ist notwendig, von den nach den ein- 

 zelnen Einwirkungszeiten hergestellten Proben mehrere Kulturen anzulegen 

 und aus der oft schwankenden Zahl der aufgegangenen Kolonien das 

 Mittel zu ziehen. Drei Proben genügen nach Lauhenheimer. 



Nach einer dreitägigen Bebrütungszeit der Platten erfolgt die Aus- 

 zählung der zur Entwicklung gelangten Kolonien, d. h. es wird festgestellt, 

 wie viele Keime nach bestimmter Einwirkungszeit des Desinfiziens noch 

 vermehrungsfähig geblieben sind. Die Platten länger wio :'. Tage im Brut- 

 schrank zu lassen ist nicht nötig. •• 



Abderhalden. Handbuch der biochemischen Arbeitsmethoden. V. ') 



