Methoden zur Aufarbeitung des Blutes in seine einzelneu Bestandteile. 1 7 1 



Filter samt Niederschlag in einem Kolben mit einer genau gemessenen 

 Menge titrierter alkoholischer KaHlösung gekocht. Das verbrauchte Alkali 

 wird durch Zurücktitrieren des Überschusses bestiiiiuit. Für die Hercch- 

 nuug ist zu berücksichtigen, daß 1 Molekül Cholesterin I .Vzetylgruppe 

 bindet. 



Das Cholesterin wird in Chloroform gelöst (für o")// etwa oOcm^CHClj) 

 und mit 25 c;»^ einer nach v. Hübl bereiteten Lösung von Jod und Sublimat 

 in Alkohol versetzt. Der Cberschuli an Jod wird mit Thiosulfat znrück- 

 titriert. da 1 MolekiU Cholesterin 2 Atome Jod addiert, ist die Berechnung 

 eine einfache Sache. 



Diese Methode ist genauer und führt rascher zum Ziele, als die vor- 

 her beschriebene Azetatmethode. 



Das genaueste Verfahren ist zweifellos das von W'uulaus'^) ausge- 

 arbeitete, das darauf beruht, daß freies Cholesterin mit Digitouiu ein 

 recht beständiges Additionsprodukt liefert. Es gestattet freies Cholesterin 

 und Ester nacheinander in einer Portion zu bestimmen. 



Man verfährt folgendermaßen : Das zu untersuchende .Material löst 

 man in der öOfachen Menge kochenden 95" „igen Alkohols und versetzt 

 mit einer lo/oigen Lösung von Digitonin in Alkohol ('.'O"/,,), so lange noch 

 ein Niederschlag entsteht. Nach mehreren Stunden wird auf dem Gooch- 

 tiegel abgesaugt, mit Alkohol und Äther gewaschen, bei 100° getrocknet 

 und gewogen. 



Aus der Menge A des Additionsproduktes läßt sich die Menge C des 

 Cholesterins berechnen : 



A : C = 1539-06 : 38ß-35 2) oder C = A x 0-243 1 . 



Das Filtrat des Digitonincholesterids wird konzentriert, nach Zusatz 

 von Wasser mit Petroläther oder Äther ausgeschüttelt ; das überschüssige 

 Digitonin bleibt in der wässerig-alkoholischen Flüssigkeit . wähn-nd Chole- 

 sterinäther. Fette und andere Lipoide in den Petroläther übergehen. .Man 

 destilliert den Petroläther ab, verseift den Rückstand mit Natriumäthylat 

 in der Hitze, isoliert das gebildete Cholesterin durch Ausschütteln mit 

 Petroläther und bestimmt das Cholesterin nach der Digitoninmethode. ») 



Neben Cholesterin finden sich, wie Lifschütz*) gezeigt hat, auch 

 noch sogenannte O.xycholesterine im Plut. Ihr Nachweis wird in folgender 

 Weise geführt : 



') A. Windaus, Über die ([uantitative BestimnuniL' des Cholesterins und der 

 (holestcriiicster in oinitrfMi normalen und pathologischen Nieren. Zeitschr. f. i)hysiol. 

 Chemie. 65. llU/117 (1910). 



-) M.-G. des Additionsproduktes beziehungsweise von Cholesterin. 



^) Da das Digitonin recht wertvoll ist, cnipfielilt es sich, es jeweils wiederzu- 

 gewinnen. Dies ist leicht möglich dadurch, daü man das Addifionsprodukt etwa 

 10 Stunden mit Xylol extrahiert (im Apparat von Stock, siebe Belichte d. Deutsch. 

 Chem. Gesellsch. 39. 15)76 (1906), eine Abliildung findet sich dieses Handbuch. Bd. 1. 

 S. 183. Fig. 363). wobei das Digitonin i|uantitativ in das .\ylol ülierL'cht. 



^j Lifschütz, Die Oxydationsprodukte des ( holestcrins in den tierischen Organeu. 

 Zeitschr. f. physiol. Chemie. 53. 140 (1907). 



