Metlioden zur Aufarbeitung des Blutes in seine einzclnon Ik-strind».!!.. 



Dcfihriniertes Pferdeblut wird /iir Ahtreiimui^' der Fonneleiiicnte 

 ausgeschleudert. Das abgchohene Serum verdünnt man mit dem gleichen 

 Volum Wasser, säuert mit Kssii^säure an und entfernt durch Ilitzekoagu- 

 lation die Kiweilikörper. Der Kiweiliniedcrschlag- wird kollicrt, ansgeprellt 

 und mit Wasser nochmals aufgekocht. Ihc. \ ereinigten l'iltratc werden im 

 Vakuum eingeengt, die eingeengte Flüssigkeit nochmals unter Zusatz von 

 etwas Essigsäure aufgekocht und wieder filtriert. Sind dir eben erwähnten 

 Manipulationen richtig ausgeführt, so enthält die Flüssigkeit nnr noch 

 Si)uren von Fiweiß. Die aus etwa 100 1 Serum erhaltene Flüssigkeit wird 

 bei essigsaurer Ileaktion solange mit Quecksilberazetat versetzt, als noch 

 ein Niederschlag entsteht. Dieser Niederschlag (I) enthält Crochrom iiml 

 Antoxyproteinsäure. 



Das Filtrat dieses Niederschlags wird mit Soda und Quecksilber- 

 azetat bis zum Auftreten von gelbem (.»uecksilbero.xvd versetzt: Nieder- 

 schlag II enthaltend Oxy- und Alloxyproteinsäure. 



Niederschlag I wird durch H.,S zerlegt, das HgS abfiltriert und d<r 

 HgS-Überschuß durch einen Luftstrom verdrängt. 



Durch Ca(0H)2 fällt man die Phosphorsäure, entfernt den Kidküber- 

 schul) durch Kohlensäure und engt das Filtrat von CaCOg bis zum Sirup 

 ein. Diesen gießt man in viel 96 "/oigen Alkohol, filtriert den Niederschlag nach 

 24 Stunden ab und löst ihn in etwa Va ^ Wasser. Man säuert mit F]ssig- 

 säure an und fügt Kupferazetat zu. solange noch ein Niederschlag ent- 

 steht. Dieser grünbraune Niederschlag ( A) wird abfiltriert ; das Filti'at 

 hiervon gibt nach vorsichtigem Neuti-alisieren mit Ammoniak nach mehreren 

 Stunden einen hellgrünen Niederschlag (B), dessen Filtrat (C) zui- T'nter- 

 suchung auf Antoxyproteinsäure dient. 



Die beiden Niederschläge A und B werden durch H-^S von Kupfer 

 befreit und aus dem Filtrat vom CuS der Schwefelwasserstoff verjagt. Die 

 Lösungen enthalten nach AusAveis der Reaktionen beide Urochrom. 



Auf Antoxyproteinsäure wird das Filtrat (C) in folgender Weise 

 untersucht. Das Kupfer entfernt nuin durch IIjS, den Cberschul» an letz- 

 terem aus dem Filtrat vom CuS durch einen Luftstrom und fällt den 

 Kalk mit Oxalsäure. Aus dem Filtrat vom Kalziumoxalat zieht man durch 

 Äther die Essigsäure aus, die essigsäurefreie Lösung schüttelt man zur 

 Entfernung eventuell mitgerissener Säuren der Alloxyproteinsäurcgruppe 

 mit frisch gefälltem Bleihydroxyd, das Filtrat wird durch Baryt von über- 

 schüssigem Blei und das neuerliche Filtrat durch Kohlensäuri' von über- 

 schüssigem Baryt befreit. Das Filtrat vom BaC(>3 wiid im \'akuum ein- 

 geengt und aus dieser Lösung das Baryumsalz der Antoxyproteinsäure 

 durch Zusatz von Alkohol gefällt. Zu weiterer Beinignng löst man das 

 I'>aryumsalz in HoO, versetzt die Lösung mit der zur Ausfidlung des 

 Baryums eben notwendigen Menge von Na. SO4. fällt mitAgN(>3 vorsichtig 

 das in der Lösung sich findende Chlor aus und fügt dann zur AnsfiUlunR 

 der Antoxyproteinsäure als Silbersalz AgNOj zu. 



Abderli aldon , Handbuch der biochemischen Arboitsmothodpo. V. 13 



