Methoden zur Aufarbeitung des Blutes in seine einzelnen Hestaniiteile. 203 



erst vor kurzem an anderer Stelle ') eine einziehende l);ir.stellun[r der (iewin- 

 nung. (|ualitativen nnd (|uantitativen liestiinnuin^^ {los Iliiniogloltins erschienen. 



Ininieriiin aber mitten hier einiüc Worte über die (iewinnun;.' von 

 Hämoglohinkristallen nach der Aikoholniethodc; aus Pferde- und liindfr- 

 blut auf Grund von Erfahrun<ien, mit deren weiterer Ausarbeitung icli noch 

 beschäftigt bin, Platz finden. 



Blutkörperchen, die man entweder durch freiwilliges Sedinientieren 

 (Pferdeblut) oder durch Ausschleudern mit Hilfe der Zentrifuge isoliert 

 hat, wäscht man wiederholt (mindestens 2mal) mit 0-9°/oiger NaCl-L()sung 

 auf der Zentrifuge. 



Den Blutkörpercheubrei versetzt man dann mit etwa dem gleichen 

 \'olumen ausgekochten Wassers von etwa 40^ bringt die Mischung zweck- 

 mäßig ebenfalls auf 35 — 40" und trennt die Lösung von den ungelöst«'n 

 Körperchen, deren Menge nicht mehr allzu grolj ist, und dem Stronia mit 

 Hilfe der Zentrifuge. Die abgehol)ene Lösung kiüilt man dann auf 0'^ ab 

 und versetzt sie mit ebenfalls gekühltem absolutem Alkohol, den man unter 

 beständigem Umschütteln der Lösung in dünnem Strahl zuflielien läUt 

 (andernfalls bilden sich leicht amorphe (ieriiinsel). Bei Pferdeblut verwende 

 ich auf 5 Volumen Blutlösung ein Volumen Alkohol, bei Rinderblut auf 

 3 — 4 Volumen ein Volumen. Man bringt die Mischung bei Pferdeblut in 

 Eis, bei Rinderblut am besten in eine Kälteniisclmng (Eis und Kochsalz). 

 Bei Anwendung von Pferdeblut ist nach 12 Stunden in der Regel die ganze 

 Mischung zu einem Kristallbrei erstarrt, bei Rinderblut ist mindestens 

 24stündiges Stehen notwendig. Die Kristalle trennt man von der Mutter- 

 lauge am leichtesten und raschesten mit Hilfe der Zentrifuge, wobei es 

 sich empfiehlt, die (iläser vor dem Einfüilen des Kristallbreies abzukühlen. 



Zum Umkristallisieren dieser ersten, mit Hilfe von Alkohol erhaltenen 

 Kristalle verfahre ich in folgender Weise: Die gut ausgeschleuderten 

 Kristalle übergießt man mit soviel ausgekochtem Wasser von etwa 40°, 

 daß ein Teil der Kristalle auch beim Erwärmen der Mischung auf iSO bis 

 35" noch ungelöst bleibt. Man trennt mit Hilfe der Zentrifuge (ielöstes 

 und Ungelöstes und stellt die Lösung in schmelzendes Eis. Nach wenigen 

 Stunden (3—4) beginnt beim Pferdeblut die Kristallisation und nach 

 12 Stunden haben sich meist große Mengen von Kristallen ausgeschieden. 

 Bei Rinderblut ist langes Stehen erforderlich. Dieser Umstand bringt es 

 mit sich, daß die Kristalle aus Rinderblut meist methämoglobinhaltig sind, 

 während in dem auch noch ein :>. Mal umkristallisierten Pferdehänn>globin 

 spektrophotometrisch nachweisbare (^)uantitäten von Met-Hb sich nicht finden. 



Neben Hämoglobin findet sich nach Wooldr'idije^) Paraglobulin, 

 das man am besten aus dem Stroma, nach dem oben^i beschriebenen 



') K. Bürker, Gewinnung, (lualitative und «itiantitative Hestiinmunjr des Hämo- 

 globins. Tigerstedt, Handbuch der physiolog. Methodik. Leipzig bei Hirzel (lUlO). 



=) li. Woolrlriihfc. Zur Kenntnis der Blutkörperchen. .\rch. f. .\nat. u. Phys. 18H1. 

 (Physiol. Abteilung) S. 38U. 



") Siehe S. 146. 



