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setzt und unter häufigem Umrühren und Schütteln 24 Stunden stehen ge- 

 lassen. Enthält die Lösung dann bei der spektroskopischen Untersuchung 

 noch Hydrobilirubin, so wird das Aussalzen mit Ammoniumsulfat wieder- 

 holt. Andernfalls wird filtriert. Durch Schwenken des Gefäßes mit dem 

 rückständigen Salze läßt sich an der Wand haftender Farbstoff leicht ab- 

 lösen. Dann spült man Salz und Gefäß mit dem Filtrat auch auf das 

 Filter aus und wäscht das Filter zuletzt mit gesättigter Ammoniumsulfat- 

 lösung. Wenn das Filter mit dem Niederschlage oberflächlich lufttrocken 

 geworden ist, wird es in einem Kolben mit aufgesetztem Kühlrohr nach 

 Zusatz von verdünnter Schwefelsäure mit einer Mischung von 1 Teil Äther 

 und 2 Teilen Alkohol in der Wärme ausgezogen. Das Hydrobilirubin löst 

 sich in dem schwefelsauren Ätheralkohol. Ein dreimaliges Extrahieren ist 

 gewöhnlich genügend. Die Lösung wird nun klar abfiltriert und der Rück- 

 stand wiederholt mit schwefelsäurehaltigem Alkohol ausgewaschen. Wenn 

 die ätherisch-alkohohsche Lösung stark verdünnt ist, so wird sie auf dem 

 heißen Wasserbade mittelst des Luftgebläses eingeengt, um ihr eine gewisse 

 Konzentration zu geben. Das Volumen der Lösung wird dann genau ge- 

 messen und auf seinen P^arbstoffgehalt untersucht. 



Tsuchiya-Brugsch empfehlen zur quantitativen Bestimmung des Hy- 

 drobilirubins in der Lösung als exakteste Methode die spektrophoto- 

 metrische Bestimmung mit dem /vöm^-3far^ew5schen Spektralphoto- 

 meter. Eine genaue Beschreibung dieser Methodik siehe bei Tsuchiya- 

 Brugsch. 1 ) 



Es kann auch gewichtsanalytisch bestimmt werden so, daß man in 

 der Farbstofflösuug Chloroform auflöst und die Mischung in einem Scheide- 

 trichter mit etwa dem doppelten Volumen Wasser schüttelt. Das Chloro- 

 form nimmt den Farbstoff auf, setzt sich nach einiger Zeit ab und kann 

 abgelassen werden. Nach dem Verdunsten desselben bleibt der Farbstoff 

 zurück, welcher getrocknet und gewogen wird. 



Will man aus der ätherisch-alkoholischen Lösung das Hydrobilirubin 

 in wässeriger Lösung haben, so führt man nach Tsuchiya-Brugsch'^) das 

 Hydrobihrubin wie vorstehend in Chloroform über, läßt das Chloroform aus 

 dem Scheidetrichter ab und wäscht es in dem doppelten Volumen Wasser. 

 Dem Chloroform läßt sich das Urobilin durch langsames Schütteln mit 

 schwach Ammoniak enthaltendem Wasser entziehen, wobei zu beobachten 

 ist, daß bei Gegenwart von viel Ammoniak leicht eine sich nur sehr lang- 

 sam in ihre Bestandteile scheidende Emulsion entsteht. 



Fromholdt ^) macht darauf aufmerksam, daß bei der Hydrobilirubin- 

 darstellung möglichste Schonung des leicht veränderlichen Farbstoffes ge- 



M J- Tsiichiija (mitgeteilt von Th. Brugsch), Beiträge zur Frage der Urobilinaus- 

 scheidung. Zeitschr. f. experim. Pathol. u. Therapie. Bd. 7. H. 1. S. 353—357. 1910. 



-) J. Tsuchii/a (mitgeteilt von Th. Bnigsch), 1. c. S. 359. 



') G. Fromholdt, Beiträge zur Urobilinfrage, Zeitschr. f. experim. Pathol. u. The- 

 rapie. Bd. 7, H. 3. S. 716-717. 1910. 



