484 M. Kumagawa. 



Das nach der Verseifung gewonnene Petrolätherextrakt wird noch- 

 mals in Petroläther aufgelöst, in einen Scheidetrichter hineingebracht und 

 das Becherglas gut ausgespült, so daß der hierzu verwendete Petroläther 



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 im ganzen etwa 50 — 70 cm» beträgt. Dazu wird — absolut-alkohohsche 



Kalilauge in einer solchen Menge hinzugegeben, daß diese einem etwa 30- bis 

 40fachen Volumen des ursprünglichen Petrolätherextraktes entspricht. Die 

 Mischung wird einmal tüchtig geschüttelt. Es entsteht hierbei stets eine 

 absolut klare Auflösung. Hierzu wird ebensoviel Wasser hinzugefügt, wie 

 die zugesetzte Menge Kalilauge , und ein paar Mal geschüttelt. Indem hier- 

 durch die Konzentration des Alkohols auf ungefähr 50«/o sinkt, erfolgt 

 jetzt sofort eine glatte Trennung der oberen Petroläther- und der unteren 

 Alkoholwasserschicht. Dabei bleiben die unverseifbaren Substanzen im Petrol- 

 äther zurück, während die Seife in die untere Alkohohvasserschicht über- 

 geht. Die abgetrennte alkoholische Seifenlösung wird noch einmal mit 

 30 — 50 cm3 neuen Petroläthers geschüttelt. Der vereinigte Petroläther wird 

 verdunstet und der Rückstand durch die Nachbehandlung von der geringen 

 Menge beigemengter Fettsäuren vollkommen befreit. Zu diesem Zwecke 

 wird das Petrolätherextrakt nochmals in ein wenig absoluten Alkohol auf- 



gelöst, jetzt mit 0*5 — l'O cni^ — absolut-alkoholischer Natronlauge ver- 

 setzt, wiederum auf dem Wasserbade verdunstet und 15 — oO Minuten bei 

 100" C getrocknet. Der Pvückstand wird noch heiß mit Petroläther extra- 

 hiert, durch Asbest abfiltriert, verdunstet und nunmehr bei 100" C bis 

 zur Gewichtskonstanz getrocknet. Das so dargestellte Extrakt stellt ein 

 Gemenge von Cholesterin und noch unbekannter unverseifbarer Substanz 

 dar, deren Trennung zurzeit uns noch nicht gelungen ist. 



Wie im Eingange angeführt, ist nur ein Teil der von uns darge- 

 stellten Fettsäuren als Triglyzeride vorhanden. Die übrigen sind in ver- 

 schiedenen Formen von Lipoidsubstanzen oder Phosphatiden verteilt. Will 

 man indes die Gesamtmenge hochmolekularer Fettsäuren i) aus praktischen 

 Gründen als Neutralfett angeben, so berechnet man. wie folgt: 



[Petrolätherextrakt — (Cholesterin 4- X)] x 1-046 = Neutralfett. 



Wie man sieht, ist die Ausführung der Methode sehr einfach. Man 

 kann gleichzeitig mehrere Bestimmungen in kurzer Zeit ausführen. Unter 

 den tierischen Bestandteilen durch direkte Verseifung mit gutem Erfolg 

 auf ihren Fettsäuregehalt untersucht worden sind: Skelettmuskulatur, Herz- 

 muskel, Leber, Milz, Nieren, Nebennieren, Haut, Haut mit Haaren, Knochen, 

 Magendarmstücke mit Schleimhaut, Lungen, Aszitesflüssigkeit, Pleuraerguß 

 usw. 2) Flüssigkeiten mit sehr geringem Fettgehalte werden zuerst bei 

 alkalischer Pieaktion auf eine passende Menge verdunstet und durch Zusatz 



*) Die Reinheit der Petrolätherextrakte als hochmolekulare Fettsänreu wurde 

 von uns durch Elementaranalyse festgestellt (siehe Uriginalahhandlung). 



°) Die Untersuchungen hierüber hat Y. Shimidzu sowie Rinji Watanahe ausge- 

 führt. Die Resultate darüber wird R. Watanahe demnächst berichten. 



