Die Arbeitsmethoden bei N'ersucheii über Anaphylaxie. 'y^n 



liehe anapliylaktischo Ausschläfro. In iilmlichcr Weise könnte mit anderen 

 drüsigen Organen verfahren werden. 



6. Der Nachweis von Anapliylatoxin (E. Friedberger). 



\on besonderer liedeutnng für die Anaphylaxieforschung sind in 

 letzterer Zeit die lieagen/glasversuche geworden , unter ihnen wieder der 

 von E. Friedberger ^) zuerst eri)raehte Nachweis, dati l)eini Zusammentreffen 

 von Ambozeptor. Komplement und Antigen ein (Üft in vitro sieh bilde, 

 welches akut unter den Erscheinungen des anaphylaktischen Shocks die Tiere 

 zu töten vermag. Die dabei gebräuchliche \'ersuchstechnik, bei deren Wieder- 

 gabe wir uns an die Angaben E. Friedberger s anlehnen, ist die folgende: 

 Bei der (iewinnung von Anaph ylatoxiu aus Eiweißlösungen 

 spielen, wie E. Friedberger und C.Vallardi"-) zuerst erkannten, folgende 

 Faktoren eine Kolle, deren genaue Berücksichtigung eine conditio sine qua 

 non für die Erzielung giftiger Abgüsse biklct: Die Beschaffenheit (Wertig- 

 keit) und Menge des Ambozeptors (also des Immunserum.'^), die Antigenmenge, 

 die Komplementmenge und endlich die Zeitdauer sowie die äußeren Bedin- 

 gungen ihres gegenseitigen Aufeinanderwirkens. ^Vls optimal hat sich den 

 Autoren die nachfolgende Versuchsbedingung erwiesen: 



Bereitung der Antisera: Kaninchen erhalten pro Kilogramm 

 Körpergewicht 1 cni^ Hammelserum intravenös eingespritzt. Nach ö Tagen 

 wird die Injektion wiederholt und nach weiteren 7— S Tagen eine Blut- 

 probe aus der Ohrvene entnommen. Wenn das Serum Hammeleiweill min- 

 destens 1 : 10.000 in wenigen Minuten bei Zimmertemperatur präzipitiert, 

 wird das Tier entblutet, das Serum abgeschieden und kurze Zeit bei öH" 

 inaktiviert. Ein zu langes Inaktivieren schädigt die Giftbildung ganz enorm, 

 muß daher vermieden werden. 



Giftdarstellung: Mengen von je 2 cm^ des präzipitierenden Immun- 

 serums werden mit je 1 cm^ in gleicher "Weise inaktivierten ll.tmmel- 

 serums versetzt. Die Proben kommen auf eine Stunde in den Brut>chrank 

 und werden dann noch 24 Stunden bei Zimmertemperatur im Dunklen 

 stehen gelassen. Am nächsten Tage werden die rräzijiitate von der dar- 

 überstehenden Flüssigkeit abzentrifugiert, einmal, oder besser noch mehr- 

 mals mit physiologischer Kochsalzlösung zur Entfernung der letzten, an 

 sich giftig wirkenden Antiserumspuren gewaschen und mit je ;'» rw/' frischen 

 Meerschweinchenkomplements versetzt. Zur (iewinnung des Komplenn*nts 

 sollen selbstverständlich nur ungebrauchte, am besten ;iOO — .•'»;'>() y schwere 

 Meerschweinchen ausgeblutet und ihr Seium sofort verwendet werden. Die 

 Mischung von Präzipitat und Komplement wird wieder eine Stnntle Itei 

 l-iT^» und weitere 24 Stunden bei Zimmertem|)eratur stehen gelassen, zentri- 

 fugiert und der Abguß, welcher das freie Anapliylatoxin enthält, auf seine 



') E. Friedberger, Weitere Uutersnchuni:cii iUn-r Eiweißan.Tpbvl.ixip. Zeitsrbr. f. 

 Immuuitiltsforsch. Bil. 4. H. ö. pag. 636. 



'-) E. Fried hcri/ir \md C. VaUardi, über Aiiapliylaxie. S. Mut. /eirMiir. i inineim- 

 tätsforschung. Bd. 7. II. 1/2. pag. U4. 



